Prospecção e caracterização de isolados de Bacillus thuringiensis no controle de Spodoptera frugiperda / Collect and characterization of Bacillus thuringiensis isolated in control OF Spodoptera frugiperda

AUTOR(ES)
FONTE

IBICT - Instituto Brasileiro de Informação em Ciência e Tecnologia

DATA DE PUBLICAÇÃO

29/07/2011

RESUMO

Bacillus thuringiensis (Bt) é uma bactéria de ocorrência ubíqua encontrada em substratos como solo, água, superfície de plantas, insetos mortos, etc, caracterizada pela produção de proteínas tóxicas a insetos (Cry, Cyt e Vip). Bt é considerada a principal bactéria entomopatológica com ampla utilização no controle biológico de pragas, como inseticidas e em plantas transgênicas resistentes a pragas. O objetivo desse trabalho foi a prospecção de cepas de Bt em diferentes áreas, a caracterização gênica, a diversidade genética existente entre elas e sua toxicidade para Spodoptera frugiperda, uma das pragas mais importante do milho. As amostras foram coletadas na área experimental da Embrapa Milho e Sorgo (solo e palhada da mata de pinheiros; solo de cerrado; solo de lavoura/pecuária; solo da margem da lagoa; solo de área com utilização de pivô central; solo de várzea; solo de usina de álcool desativada). Após o isolamento, reações de PCR foram realizadas utilizando primers (originais e descritos na literatura) para a caracterização dos genes cry, cyt e vip. O estudo da divergência genética entre as cepas utilizou o método de rep-PCR, com os primers BOX-PCR, ERIC1/ERIC2-PCR e REP1/REP2-PCR. O teste de toxicidade foi feito em bioensaio utilizando suspensões de Bt, controle positivo (Bt344 B. tolworthi) e testemunha. As lagartas usadas estavam no segundo instar e a avaliação foi feita após 1 semana. Das 178 colônias obtidas, cristais foram detectados em 35% das colônias, sendo a palhada da mata de pinheiro a maior incidência com 68%, seguido da área do pivô (21%), área da lagoa, várzea e usina de álcool desativada (3%) e solo da área de pinheiro (2%), nenhuma cepa foi encontrada nas regiões do cerrado e lavoura/pecuária. Nas amostras, observou-se quanto ao formato, que 64,5% dos cristais são esféricos, 29% esférico e cubóide e 6,5% em formato bipiramidal. Os genes mais abundantes nesta amostragem foram cry1Ab, vip3Aa e cry9, com 63%, 56% e 43%, respectivamente. Os genes cyt tiveram sua maior frequência com cyt1Aa/cyt1Ab/cyt1Ba, presente em 5% das cepas. Quanto à diversidade genética, quatro grupos foram distintamente definidos e os dados sugerem uma relação entre a similaridade de cepas de B. thuringiensis e seus locais de origem. As cepas analisadas não apresentaram taxas significativas de mortalidade para S. frugiperda (máxima de 20%), observou-se uma tendência ao agrupamento de cepas com mesmo padrão de mortalidade. Já com relação à constituição gênica não foi observada relação direta com a diversidade das cepas, mas indireta pela formação do cristal, apresentando essa forte relação com os grupos de similaridade formados

ASSUNTO(S)

bactéria entomopatogênica rep-pcr bioensaio lagarta-do-cartucho genes bt ciencias biologicas entomopathogenic bacterium rep-pcr bioassay fall armyworm bt genes

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