ProduÃÃo e caracterizaÃÃo parcial de colagenase de Candida albicans URM 3622

AUTOR(ES)

Carolina de Albuquerque Lima

DATA DE PUBLICAÇÃO

2008

RESUMO

Colagenases sÃo enzimas proteolÃticas capazes de degradarem diferentes tipos de colÃgeno e apresentam alta especificidade a estas molÃculas. Dentre os vÃrios organismos capazes de produzirem estas enzimas, estÃo as leveduras. As colagenases tÃm as mais variadas aplicaÃÃes. Destacam-se as aplicaÃÃes na indÃstria de fÃrmacos, onde sÃo utilizadas no tratamento de cicatrizes hipertrÃficas, na indÃstria de cosmÃticos (dermocosmÃticos), usadas no tratamento de acnes e rugas, e na indÃstria alimentÃcia, no amaciamento de carne. O presente trabalho objetivou a seleÃÃo de espÃcies do gÃnero Candida, produtoras de colagenase extracelular, a determinaÃÃo das condiÃÃes de cultivo para a produÃÃo da enzima atravÃs de processo fermentativo e a caracterizaÃÃo bioquÃmica parcial da colagenase. Para isto, foram realizados experimentos de fermentaÃÃo com o auxÃlio de planejamentos estatÃsticos (fracionÃrio- 26-2 e completo-23) para a seleÃÃo das melhores condiÃÃes de produÃÃo. No estudo de seleÃÃo identificou-se que a espÃcie Candida albicans URM3622 apresentou maior atividade colagenolÃtica qualitativa no meio Ãgar-gelatina (halo = 25 mm), e quantitativa (5,0 U/ml) utilizando azocoll como substrato. A anÃlise dos dados do planejamento estatÃstico fracionÃrio (26-2) demonstrou que entre as variÃveis estudadas (pH, tempo de produÃÃo, velocidade de agitaÃÃo, temperatura, concentraÃÃes do inÃculo e do substrato), a concentraÃÃo do substrato (gelatina) e a velocidade de agitaÃÃo foram as variÃveis mais significativas para a produÃÃo da colagenase. Com base nestes resultados foram executados dois planejamentos estatÃsticos completos (23) sucessivos nos quais foram estudados, a concentraÃÃo do substrato, a velocidade de agitaÃÃo e o pH. Estes planejamentos demonstraram que todas as variÃveis foram significativas para a produÃÃo da enzima e que a produÃÃo mÃxima foi obtida utilizando o pH 7,0, a velocidade de agitaÃÃo de 160 rpm e a concentraÃÃo de substrato de 2%. Sob estas condiÃÃes foi obtida uma atividade colagenolÃtica de 6,7  0,2 (U/ml). No estudo da caracterizaÃÃo parcial da enzima observou-se que a enzima apresentou o pH 8,2 como Ãtimo para a sua atividade e a temperatura Ãtima de 45 ÂC. A colagenase mostrou-se estÃvel aos valores de pH na faixa de 7,2 a 8,2 e à temperatura na faixa de 28 ÂC a 45 ÂC. Os resultados obtidos demonstram que a Candida albicans (URM3622), à uma fonte viÃvel de colagenase, sendo assim a sua produÃÃo à de interesse para as indÃstrias farmacÃutica, cosmÃtica e alimentÃcia.

ASSUNTO(S)

partial characterization candida albicans biologia e fisiologia dos microorganismos colagenase planejamento estatÃstico collagenase candida albicans experimental statistical designs caracterizaÃÃo parcial

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