Lipase de farelo de arroz : extração, imobilização e aplicação

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2000

RESUMO

Extratos bruto de lipase (EB) obtidos a partir de farelo de arroz previamente desengordurado, foram extraídos com três diferentes soluções: 1(CaCb 10mM), 2 (Sacarose 0,6M, KCI 10mM, MgCb 1mM, Ditiotreitol 2mM) e 3 (Sacarose O,4M, DitiotreitoI2mM). A metodologia de superfície de resposta foi aplicada, sendo os fatores (variáveis) estudados: pH (6,0; 7,0 e 8,0) e tempo de extração (1h, 2h e 3h). A temperatura de extração foi fixada em 4°C. Os extratos obtidos apresentaram diferentes graus de atividade de lipase, sendo que o extrato bruto que apresentou a maior atividade específica de lipase, foi a solução 1 (13,5mU/mg). Realizou-se a purificação parcial deste extrato bruto através de dois métodos distintos de precipitação de lipase, resultando em extrato semipurificado com acetona (ESP-acetona) e extrato semi-purificado com sulfato de amônio (ESP-sulfato amônio), que apresentaram atividade específica de 50,7mU/mg e 63mU/mg, respectivamente. Os extratos semi-purificados foram imobilizados por adsorção sobre vários suportes, dos quais poliamida e sílica, apresentaram os maiores índices de atividade específica de lipase, correspondente a 48,4mU/mg e 48,2mU/mg respectivamente para o ESP-acetona e 59,3mU/mg e 59,7mU/mg para o ESP-sulfato amônio. Dos ESP imobilizados, avaliou-se sua capacidade hidrolítica sobre diferentes triacilgliceróis e de síntese de ésteres utilizando diferentes substratos. A tributirina seguida do óleo de oliva e óleo de arroz, foram os substratos que apresentaram os maiores índices de hidrólise. A reação entre álcool metílico e ácido butírico apresentou o maior índice de conversão de ácidos em ésteres para os ESP imobilizados em poliamida e álcool butírico e ácido butírico para os ESP imobilizados sobre sílica. Avaliouse o comportamento de atividade de lipase de todos os extratos durante 8 meses. Os ESP acetona e sulfato de amônio imobilizados apresentaram atividade cerca de 2,4 a 2,6 vezes maior que os ESP não imobilizados. O extrato bruto armazenado congelado a -18°C, apresentou atividade de lipase muito reduzida e o EB refrigerado a 4°C, não mais apresentou atividade no tempo final do experimento

ASSUNTO(S)

farelo de arroz enzimas lipase

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