Extração, purificação, imobilização, estudo cinetico e calorimetrico das enzimas proteoliticas presentes no latex do mamoeiro

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

1994

RESUMO

As enzimas papaína, quimopapaína B e papaya proteinase foram extraidas e purificadas a partir do látex seco de Carica papaya. O método desenvolvido neste trabalho para a purificação das enzimas proteolíticas mostrou ser possível a separação das mesmas em um único passo, utilizando gradiente de força iônica crescente com tampão acetato de sódio pH 5,0. As proteases livres e imobilizadas foram utilizadas para estudos cinéticos e calorimétricos utilizando substratos sintéticos e proteicos. A imobilização em sílica funcionalizada mostrou ser muito eficiênte mantendo a atividade enzimática por vários meses. Papaína e quimopapaína B apresentaram maior afinidade pelos substratos proteicos do que a papaya proteinase. Para as enzimas imobilizadas papaína apresentou maior afinidade pelo substrato do que as outras proteases. Estudos calorimétricos mostraram que as enzimas quimopapaína B e papaya proteinase são termicamente reversíveis e que a desnaturação destas enzimas obedece um modelo de transição de dois estados. Confirmou-se a existência de estados intermediários de desnaturação para a papaína. Foram determinados os valores da entaIpia de desnaturação,DHDESN, para as proteases, assim como a razão DHvanTHoff/DHDENS. Apesar das enzimas terem uma estrutura primária muito sementante a variacão de entalpia de proteólise DH PROT é muito diferente.

ASSUNTO(S)

latex enzimas proteoliticas calorimetria papaina

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