Clonagem e expressão de fragmentos de anticorpos (FABs) anti-HIV-1 em Pichia pastoris

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

2009

RESUMO

A Sindrome da Imunodeficiencia Adquirida (AIDS) e uma doenca pandemica que atinge diversos paises no mundo todo. Atualmente, nao existe uma vacina eficiente contra o virus da imunodeficiencia (HIV) devido a habilidade do virus de escapar do sistema imune. Contudo, estudos recentes tem utilizado glicoproteinas do envelope do HIV como potencial alvo para o desenvolvimento de uma vacina capaz de inibir a entrada do virus na celula hospedeira. Recentemente, nosso grupo selecionou fragmentos de anticorpos (Fabs) de uma biblioteca combinatoria de anticorpos de pacientes com osteosarcoma direcionados para um peptideo sintetico de um epitopo neutralizante da gp41. No presente trabalho, foram clonados os Fabs anti-gp41-HIV em vetor de expressao de Pichia pastoris. Apos a obtencao das clonagens dos Fabs nesse vetor as respectivas sequencias foram confirmadas. A levedura Pichia pastoris tem sido largamente utilizada para a producao de proteinas recombinantes com sucesso. O nivel de expressao obtido para os Fabs na levedura Pichia pastoris foi muito baixo. Esses Fabs demonstraram possuir um bom indice de adaptacao de codon para a expressao em Pichia pastoris. Dessa forma, ajustes no protocolo de expressao deverao ser realizados.

ASSUNTO(S)

hiv biologia molecular gp41 fab fab hiv pichia pastoris pichia pastoris gp41 clonagem cloning

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