CaracterizaÃÃo funcional de homÃlogos à proteÃna de ligaÃÃo a Cauda Poli-A (PABP) de Leishmania major

AUTOR(ES)

Tamara deâCarli da Costa Lima

DATA DE PUBLICAÇÃO

2007

RESUMO

A proteÃna de ligaÃÃo à cauda poli-A (PABP) se liga a seqÃÃncia de poli adenosinas presente na extremidade 3â do mRNA e possui uma multiplicidade de funÃÃes dentro da cÃlula. Dentre as funÃÃes atribuÃdas a PABP destaca-se sua participaÃÃo em eventos da sÃntese de proteÃnas, tais como iniciaÃÃo e terminaÃÃo da traduÃÃo e reciclagem dos ribossomos, e seu envolvimento no transporte de alguns mRNAs do nÃcleo para o citoplasma. O objetivo deste trabalho à caracterizar homÃlogos de proteÃnas relevantes à iniciaÃÃo da traduÃÃo em tripanosomatÃdeos. O estudo da PABP teve inÃcio com a busca em bancos de dados de L. major de possÃveis homÃlogos, onde foi encontrado tanto o homÃlogo previamente descrito (LmPABP1) como mais dois homÃlogos (LmPABP2 e LmPABP3), sendo que o Ãltimo nÃo possui ortÃlogos em Trypanosoma. Os trÃs genes foram amplificados, clonados, as proteÃnas expressas e utilizadas para produÃÃo de soro policlonal. Em seguida foi realizada a quantificaÃÃo dos nÃveis intracelulares das trÃs proteÃnas em extratos da forma promastigota de L. major sendo a LmPABP2 a mais abundante, a LmPABP3 em nÃveis intermediÃrios e a LmPABP1 a menos abundante. No entanto, as LmPABP2-3 sÃo detectadas com uma Ãnica forma, enquanto que a LmPABP1 està presente em duas isoformas, provavelmente uma delas devido a fosforilaÃÃo. AnÃlises da expressÃo durante o ciclo evolutivo do parasita mostrou que as trÃs proteÃnas encontravam-se presentes em todas as formas evolutivas, porÃm a LmPABP3 mostrou um decrÃscimo na fase estacionÃria de crescimento e a LmPABP1 apresenta-se fosforilada apenas nas primeiras horas apÃs o repique. Experimentos de localizaÃÃo subcelular indicam que a LmPABP1 està presente na fraÃÃo citoplasmÃtica, enquanto que LmPABP2-3 estÃo presentes tanto na fraÃÃo citoplasmÃtica quanto na nuclear, porÃm com predominÃncia da fraÃÃo nuclear. Estudos adicionais precisam ser feitos pra entender como estas proteÃnas diferem funcionalmente e quais seus papÃis na sÃntese protÃica

ASSUNTO(S)

trypanosomatids pabp translation initiation iniciaÃÃo da traduÃÃo genetica pabp tripanosomatÃdeos

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