Sensibilidade da reação em cadeia da polimerase para a detecção de alíquotas conhecidas do Trypanosoma cruzi no sangue da camundongos: estudo in vitro

AUTOR(ES)

Campos, Rozália F., Magalhães, Juracy B., Reis, Eliana A.G., Reis, Mitermayer G., Andrade, Sonia G.

FONTE

Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical

DATA DE PUBLICAÇÃO

2002-10

RESUMO

A sensibilidade da reação em cadeia da polimerase (PCR) para revelar a presença de números conhecidos de tripomastigotas no sangue de camundongos, foi investigada em três experimentos separados. No primeiro, foram adicionados 1, 2, 3, 4, 5, 10, 20 e 50 tripomastigotas respectivamente, em oito amostras de 500mil de sangue de camundongo. No 2º e 3º experimentos: foram feitas 10 amostras contendo 1, e 10 amostras contendo 2 tripomastigotas/500mil de sangue. Controle positivo: 500mil de sangue contendo 100.000 trypomastigotas. Para amplificação dos minicirculos do kDNA pela PCR foram usados os iniciadores S35 e S36. A PCR revelou produtos de 330 p.b nos controles positivos e nas amostras contendo de 3 a 50 tripomastigotas. Quando apenas uma amostra contendo 1 ou 2 tripomastigotas foi examinada, os resultados foram negativos, porém no 2º e 3º experimentos 9/10 amostras contendo 1 e 2 tripomastigotas foram PCR positivas, revelando alta sensibilidade da reação. Em conclusão, a presença de um só parasito em 500mil de sangue é suficiente para uma PCR positiva e este método pode ser usado como complementação dos demais testes parasitológicos de cura, em camundongos tratados, quando pequenos volumes de sangue são individualmente examinados.

ASSUNTO(S)

trypanosoma cruzi reação em cadeia da polimerase sensibilidade da pcr em camundongos pcr como teste de cura

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