Resistance molecular mechanism analyse of Helicobacter pylori to amoxicilin / Analise dos mecanismos moleculares de resistencia de Helicobacter pylori a amoxicilina

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

2007

RESUMO

A maioria dos isolados de H. pylori é sempre susceptíveis à amoxicilina, um antibiótico comumente usado na terapia de erradicação do H. pylori. Entretanto, a resistência à amoxicilina é emergente nos isolados clínicos, especialmente em paises onde esse antibiótico pode ser obtido sem prescrição. Assim, o mecanismo molecular de resistência a amoxicilina tem sido apenas identificada em poucas H. pylori AmoxR e tolerantes. Este trabalho analisou os genes que atualmente apresentam maior probabilidade de estarem envolvidos no mecanismo de resistência e também a expressão gênica diferencial de uma linhagem resistente à amoxicilina crescida em presença e ausência da droga. Depois de realizada a transformação com o DNA genômico, foi feito também a transformação natural, da linhagem susceptível 26695 com os genes, previamente amplificados por PCR, pbp1A, pbp2, ftsI (pbp3), pbp4, hcpA, lytB, rodA1, mreC, mreB, e llm, dos isolados clínicos resistentes. Apenas a transformação realizada com o gene pbp1A resultou em colônias amoxR de todos os sete isolados clínicos estudados. A resistência foi mediada por várias alterações mutacionais no segundo e terceiro motif conservado de PBP1A e suas adjacências. Todos os 8 transformantes AmoxR analisados continham uma substituição T555R e N542Y, sete dos transformantes AmoxR apresentavam a substituição S402G, E406A, e S417T, enquanto que um transformante tinha apenas a substituição S414R. Entretanto não podemos excluir a relação de outros genes a essa resistência. Para avaliar se a resistência da linhagem Hardenberg apresenta uma expressão gênica diferencial quando entra em contato com a amoxicilina, foi realizada a técnica de RAP – PCR. Foram usados 5 diferentes pares de primers arbitrários que geraram 101 bandas com expressão diferencial. Nossos resultados mostraram que a amoxicilina altera a expressão de genes envolvidos na adaptação da bactéria a nova situação. Neste sentido, os resultados que foram obtidos com este trabalho poderão contribuir para a caracterização molecular dos mecanismos de resistência das linhagens brasileiras de H. pylori à amoxicilina, droga essa usada na terapia de erradicação.

ASSUNTO(S)

amoxicilina helicobacter pylori amoxicilin

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