Purificação e caracterização de uma CA2+ -ATPase de larva de Pachymerus nucleorum (Fabricius) (Coleoptera: Chrysomelidae: Bruchinae)
AUTOR(ES)
Hugo Christiano Soares Melo
DATA DE PUBLICAÇÃO
2008
RESUMO
CAPITULO III: Miosina pode ser precipitada pelo congelamento e descongelamento de fração solúvel de diferentes tecidos de mamíferos. Nesse trabalho, o objetivo foi precipitar ATPase similar à miosina a partir de fração solúvel de larva de P. nucleorum. A fração solúvel foi congelada a -20 oC e descongelada após 48 horas. O precipitado foi recuperado por centrifugação a 45.000 g x 40 minutos e foi lavado sucessivamente com solução tampão em pH 7,5 e 9,0. Posteriormente, ATPase foi solubilizada pelo tratamento do precipitado com solução tampão pH 9,0 contendo 0,5 mol.L-1 de NaCl. Os principais polipeptídeos da fração ATPase apresentaram Mr de 205 e 45 kDa. Essa fração expressou alta atividade Ca- ATPase, mas não apresentou atividade Mg2+-ATPase e nem K+/EDTA-ATPase. A atividade Ca2+-ATPase não foi inibida por tapsigargina 140 μ mmol.L-1, ouabaína 1,7 mmol.L-1 ou azida 1 mmol.L-1. A atividade foi sensivelmente inibida por magnésio, mas praticamente não foi inibida por cobre ou zinco. A enzima não hidrolisou AMP e nem PPi e hidrolisou muito pouco ADP e GTP. Nesse trabalho, foi isolado um polipeptídeo de 205 kDa de larva de P. nucleorum, que co-purificou com atividade Ca2+-ATPase.
ASSUNTO(S)
larva proteínas atpase genetica larvae purificação pachymerus purification
ACESSO AO ARTIGO
http://www.bdtd.ufu.br//tde_busca/arquivo.php?codArquivo=2252Documentos Relacionados
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