Protocolo da extração de DNA de material parafinado para análise de microssatélites em leiomioma

AUTOR(ES)

Nascimento, Ericson Martins, Spinelli, Marilda Osti, Rodrigues, Consuelo Junqueira, Bozzini, Nilo

FONTE

Jornal Brasileiro de Patologia e Medicina Laboratorial

DATA DE PUBLICAÇÃO

2003-09

RESUMO

É apresentada a padronização de protocolo de extração de DNA de material parafinado para análise da instabilidade de microssatélites de genes relacionados ao leiomioma uterino, utilizando-se 30mg a 40mg de tecido retirado de blocos de parafina. Os blocos são desparafinizados por banhos de xilol a 65ºC, reidratados com soluções de concentrações decrescentes de ETOH e água deionizada. A extração de DNA é obtida através das etapas de lise celular, com solução Promega, digestão de proteínas por proteinase K, precipitação com proteínas com solução Promega e precipitação do DNA com ETOH 70% gelado e ressuspendido com solução Promega. Este protocolo resulta em um DNA viável para uso na reação em cadeia da polimerase (PCR).

ASSUNTO(S)

leiomioma uterino instabilidade de microssatélites material parafinado

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