Produção, purificação e caracterização de enzimas celuloliticas termoestaveis de Humicola sp 179-5 e aplicação destas enzimas

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

1992

RESUMO

Uma linhagem de fungo termófilo xilanolítico Humicola sp foi isolada a partir de madeira em decomposição da floresta Amazônica, O fungo produziu quantidade significativa de xilanases termoestáveis quando cultivado a 50ºC em meio de farelo de trigo. A produção de avicelase foi desprezível e de extrato enzimático bruto hidrolsou xilano a 60%, como xilose. Além de atividade de xiIanase o extrato enzimático bruto apresentou atividade de CMCase e de β-glicosidase que foram caracterizadas fisico-quimicamente. A xilanase termoestável a 60°C por 1 hora, foi purificada através de cromatografia em caluna de DEAE-Sephadex A-50 e CM-Sephadex C-50 e revelou três frações de proteínas com atividades xilanásicas, A fração X/1 não se ligou à coluna de DEAE-Sephadex A-50 e foi eluida no volume correspondente ao volume morto da coluna. Os pHs ótimos e temperaturas ótimas das xilanases purificadas foram; 5,0-5,6 e 75°C (X-I); 4,2 e 65ºC (X-II); 5,0-5,6 e 75°C X-III). HgCl2 inibiu completamente as três xilanases, CuSO4.H2O inibiu-as fortemente e MgSO4.7H2O, CoCl2.6H20, FeCl3.6H20 e EDTA acarretaram inibições siqnificativas. CaCl2 estimulou a atividade das três xilanases enquanto iodoacetamida não afetou a atividade destas enzimas. Os pesas moleculares das xilanases X-I e X-II foram 30.000 Da e 43.000 Da, respectivamente. As xilanases X-I e X-III são endoxílanases e hidrolisaram xilano produzindo xilose, xilobiose, xilotriose e outros xiloligossacarídeos. A xilanase X-II é exoxilanase cujo produto da ação sobre xilano foi unicamente xilose. A fração X-I não apresentou nenhuma outra atividade enzimática, enquanto as frações X-II e X-III mostraram atividades de CMCase e de arabinofuranosidase. A polpa de eucalipto branqueada, obtida por processo Kraft, quando tratada com a xilanase X-I resultou em melhora da qualidade do papel (alvura o viscosidade). Entretanto, o tratamento com as xiIanases X-II e X-III aumentou a alvura mas reduziu a viscosidade devido a degradação da celullulose. O tratamento com a enzima bruta também melhorou a qualidade da polpa porque o extrato enzimático bruto possui baixa atividade CMCase

ASSUNTO(S)

lignocelulose celulose lignina

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