Ocorrência da fosfatase do mio-inositol-1-fosfato em pteridófitas: características da enzima a partir de pínulas reprodutivas de Dryopteris filix-mas (L.) Schott
AUTOR(ES)
Banerjee, Ritwika, Chhetri, Dhani R., Adhikari, Jukta
FONTE
Brazilian Journal of Plant Physiology
DATA DE PUBLICAÇÃO
2007-06
RESUMO
Tem-se detectado atividade da fosfatase do mio-inositol-1-fosfato (FMIF) tanto em órgãos vegetativos como em estruturas esporulantes de algumas pteridófitas com ampla diversidade filogenética. Neste estudo, procedeu-se à caracterização básica dessa enzima utilizando-se da pteridófita cosmopolita Dryopteris filix-mas. Após centrifugação em baixa velocidade, precipitação com sulfato de estreptomicina, fracionamento com sulfato de amônio (25-70%), cromatografia em CM Sephadex C-50 e, finalmente, filtração gélica em Ultrogel AcA 34, conseguiu-se uma purificação parcial da enzima (a partir da fração citossólica obtida de pínulas reprodutivas da planta) de cerca de 41 vezes em relação ao homogenato inicial. O peso molecular aparente da FMIF nativa foi estimado em 94 kDa. A atividade da enzima aumentou linearmente com relação ao conteúdo de proteína (cerca de 150 µg) e com relação ao tempo (até 75 min). A temperatura ótima foi de 40ºC. Entretanto, a enzima exibiu atividade razoável na faixa de temperatura entre 30 e 50ºC. O D/L-mio-inositol-1-fosfato foi o principal substrato (95-100%) da enzima, porém registrou-se uma atividade de cerca de 16% quando este composto foi substituído pelo D-mio-inositol-3-fosfato. Ademais, observou-se fraca atividade (3%) da FMIF quando se utilizou o 2-glicerol-fosfato como substrato. O Km aparente para a enzima foi 0,083 mM. A enzima mostrou-se funcional numa estreita faixa de pH (7,5 a 8,5). Sua atividade foi fortemente inibida pelo lítio, um cátion monovalente; mesmo a concentrações baixas (1 mM), o lítio inibiu moderadamente a atividade da FMIF. Por outro lado, o magnésio, um cátion divalente, aumentou a atividade da enzima, no mínimo até a concentrações de 10 mM. O cálcio diminuiu a atividade da FMIF em concentrações superiores a 4 mM.
ASSUNTO(S)
dryopteris filix-mas fosfatase do mio-inositol-1-fosfato pínulas reprodutivas pteridófitas
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