Isolamento e criopreservação de folículos pré-antrais caninos

AUTOR(ES)
FONTE

IBICT - Instituto Brasileiro de Informação em Ciência e Tecnologia

DATA DE PUBLICAÇÃO

20/12/2010

RESUMO

Objetivou-se com este estudo avaliar a viabilidade de folículos pré-antrais de ovários caninos após os procedimentos de isolamento mecânico em diferentes intervalos de cortes e de criopreservação com os crioprotetores glicerol e etilenoglicol. No primeiro experimento testou-se o isolamento dos folículos pré-antrais caninos com o fatiador de tecidos (tissue chopper) programado em dois intervalos de secção (250 e 500 μm) no intuito de avaliar qual espessura de corte proporcionaria um número satisfatório de estruturas preservando sua integridade estrutural. O número de folículos isolados nas espessuras testadas não diferiu estatisticamente, sendo 25200 para o intervalo de 250 μm e 11000 para o intervalo de 500 μm (p=0,08). A viabilidade e a qualidade medidas pela integridade da membrana celular e presença de células da granulosa apresentaram melhores resultados junto aos folículos isolados na espessura de 500 μm. No segundo experimento seguinte utilizou-se o método de isolamento mecânico com o aparelho fatiador de tecidos calibrado para cortes na espessura de 500 μm (espessura do corte) e as amostras do pool folicular foram submetidas à análise de viabilidade com o corante iodeto de propídeo, perante os seguintes procedimentos: após o isolamento (grupo controle), período de estabilização com glicerol e etilenoglicol nas concentrações de 1,5 ou 3M (teste de toxicidade), após congelação e descongelação com glicerol e etilenoglicol em duas concentrações diferentes. No teste de toxicidade, apenas o grupo que utilizou etilenoglicol a 1,5 M (51,5%) não apresentou redução significativa da viabilidade folicular em relação ao controle (63,2%). Após os procedimentos de criopreservação, a viabilidade foi consideravelmente menor em todos os grupos, sendo 12% para glicerol a 1,5 M e 14% para 3,0 M e 15,5% para etilenoglicol a 1,5 M e 28% para 3,0 M. Conclui-se que o etilenoglicol demonstrou os melhores resultados após o período de exposição e procedimentos de criopreservação/descongelação.

ASSUNTO(S)

crioprotetores iodeto de propídeo toxicidade viabilidade medicina veterinaria reprodução animal biotecnologia animal cão - reprodução cryoprotectants propidium iodide toxicity viability

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