Identificação de peptídeos sintéticos ligantes à imunoglobulinas G de pacientes com neurocisticercose por Phage display

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2009

RESUMO

A neurocisticercose (NC), resultado da presença dos metacestódeos de T. solium no sistema nervoso central constitui a forma mais grave da cisticercose, sendo a principal causa de epilepsia nos países em desenvolvimento. O aprimoramento de testes imunodiagnósticos que utilizem antígenos recombinantes se faz necessário diante da dificuldade de obtenção de suínos naturalmente infectados com metacestódeos de T. solium, para a produção de antígeno. O objetivo deste estudo foi identificar peptídeos recombinantes ligantes à imunoglobulinas G de pacientes com neurocisticercose por phage display, a partir de uma biblioteca randômica de peptídeos e verificar a imunorreatividade dos fagos selecionados pelo método imunoenzimático ELISA. Uma biblioteca de peptídeos randômicos expressados em bacteriófagos filamentosos foi utilizada numa estratégia de seleção contra as imunoglobulinas (IgG) purificadas de soro de pacientes positivos para NC, outras parasitoses e aparentemente saudáveis. As seqüências do DNA correspondente aos insertos dos fagos selecionados foram seqüenciados, traduzidos e analisados por bioinformática. Foram realizados testes de ELISA com os dez fagos selecionados contra os três grupos de pacientes (NC, outras parasitoses e saudáveis). A especificidade de ligação dos fagos ao pool de soros foi analisado por ELISA de competição. Os peptídeos apresentaram similaridades significativas com proteínas importantes do parasito T. solium. Todos os clones apresentaram eficiência de diagnóstico satisfatórias no teste ELISA variando de 90 a 95%. Alguns clones não apresentaram reatividade com o soro de pacientes infectados com Echinococcus granulosus, o que representa um grande avanço uma vez que esta reatividade cruzada é muito freqüente. Os dados de reconhecimento no teste de competição indicaram que os peptídeos selecionados podem mimetizar epítopos de T. solium e se ligar especificamente ao pool de soro de pacientes com NC. Conclui-se que os fagos identificados apresentaram peptídeos específicos para NC e são potenciais biomarcadores no diagnóstico da doença em amostras de soro.

ASSUNTO(S)

taenia solium elisa imunologia aplicada imunodiagnóstico peptídeos cisticercose cerebrospinal phage display, peptides neurocisticercose teste imunoenzimático neurocysticercosis

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