FORMAÃÃO DE BIOFILME EM AÃO INOXIDÃVEL, BIOTRANSFERÃNCIA E SENSIBILIDADE DE Listeria monocytogenes A ÃLEOS ESSENCIAIS

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2009

RESUMO

A formaÃÃo de biofilmes em superfÃcies industriais pode levar à contaminaÃÃo de alimentos. Dentre os microrganismos envolvidos, destaca-se Listeria monocytogenes, devido à sua distribuiÃÃo ubÃqua, capacidade de sobrevivÃncia em condiÃÃes adversas e elevada patogenicidade. Logo, o desenvolvimento de novas alternativas de controle à fundamental. Este trabalho foi realizado no intuito principal de estudar a formaÃÃo do biofilme por L. monocytogenes ATCC 19117 sobre superfÃcie de aÃo inoxidÃvel AISI 304 (#4) e avaliar a sensibilidade de cÃlulas planctÃnicas e sÃsseis frente à aÃÃo antibacteriana dos Ãleos essenciais de Cymbopogon citratus (D.C.) Stapf. e Cymbopogon nardus (L.) Rendle. A extraÃÃo dos Ãleos essenciais foi realizada por hidrodestilaÃÃo utilizando-se aparelho de Clevenger modificado. O efeito bacteriostÃtico de diferentes concentraÃÃes dos Ãleos essenciais, puros e em combinaÃÃo, foi avaliado pela tÃcnica de difusÃo em Ãgar. As concentraÃÃes mÃnimas inibitÃrias (CMIs) encontradas foram utilizadas na determinaÃÃo do tempo de aÃÃo bactericida. A formaÃÃo do biofilme foi realizada sobre superfÃcie de cupons de aÃo inoxidÃvel, utilizando-se como substrato caldo triptona de soja, com incubaÃÃo a 37ÂC e agitaÃÃo de 50 rpm. O nÃmero de cÃlulas aderidas foi determinado apÃs 3, 48, 96, 144, 192 e 240 horas e o potencial de biotransferÃncia a partir das 96 horas. Cupons de aÃo inoxidÃvel foram submetidos à microscopia eletrÃnica de varredura (MEV) apÃs 3, 144 e 240 horas. SoluÃÃes sanificantes à base de Ãleos essenciais e uma soluÃÃo sanificante controle foram testadas em duas etapas de formaÃÃo do biofilme (3 e 240 horas) em dois tempos de contato (15 e 60 minutos). As quantidades de Ãleos essenciais utilizadas nas soluÃÃes sanificantes foram baseadas nas CMIs e os tempos de contato foram determinados a partir dos tempos de aÃÃo bactericida. Cupons de aÃo inoxidÃvel submetidos Ãs soluÃÃes sanificantes foram analisados por MEV e tiveram o nÃmero de cÃlulas aderidas determinado. As CMIs encontradas foram de 1,56% (v/v), para o Ãleo essencial de C. citratus e para a combinaÃÃo dos Ãleos essenciais e de 3,56% (v/v) para o Ãleo essencial de C. nardus. Observou-se efeito bactericida para os Ãleos essenciais, puros e em combinaÃÃo, quando estes foram utilizados na concentraÃÃo mÃnima inibitÃria (CMI). Pelo nÃmero de cÃlulas aderidas e MEV observou-se que L. monocytogenes aderiu rapidamente à superfÃcie, formando biofilme maduro apÃs 240 horas. O potencial de biotransferÃncia da bactÃria ao substrato foi observado em todas as etapas analisadas. As soluÃÃes sanificantes à base de Ãleo essencial mostraram-se efetivas na reduÃÃo do nÃmero de cÃlulas aderidas, principalmente apÃs 60 minutos de contato. A soluÃÃo sanficante constituÃda da combinaÃÃo dos Ãleos essenciais foi capaz de reduzir 100% (5,64 Log UFC.cm-2) do nÃmero de cÃlulas aderidas apÃs 60 minutos de contato Ãs 240 horas de formaÃÃo do biofilme. Pela MEV observaram-se alteraÃÃes estruturais na superfÃcie bacteriana, provavelmente causadas pela atuaÃÃo dos Ãleos essenciais na membrana citoplasmÃtica. Apesar de L. monocytogenes apresentar risco para as indÃstrias de alimentos, devido à capacidade de rÃpida adesÃo e ao potencial de biotransferÃncia, Ãleos essenciais de C. citratus e C. nardus apresentam atividade antibacteriana frente a cÃlulas planctÃnicas e sÃsseis e sÃo novas alternativas naturais a sanificaÃÃo de superfÃcies de aÃo inoxidÃvel. O efeito sinergÃstico da combinaÃÃo dos mesmos nÃo deve ser descartado e representa uma maneira de potencializar a atividade individual desses compostos.

ASSUNTO(S)

cymbopogon sp ciencia de alimentos sanificantes naturais biofilme listeria monocytogenes Ãleos essenciais

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