Enzimas que lisam a parede celular de leveduras : clonagem e sequenciamento do gene da [beta]-1,3-glucanase litica de Cellulomonas cartae 191

AUTOR(ES)

Giselle Alessandra Martins Soares

DATA DE PUBLICAÇÃO

2002

RESUMO

A linhagem 191, isolada previamente no laboratório de Bioquímica da FEA-UNICAMP e identificada como Cellulomonas cartae, é uma boa produtora da enzima beta 1,3-glucanase envolvida na lise da parede celular de levedura. O objetivo deste trabalho foi o estudo da beta -1,3-glucanase lítica produzida pela linhagem C. cartae 191; sua produção em meio de cultura, purificação e a clonagem molecular do gene que codifica essa enzima. A linhagem 191 foi crescida em meio contendo diferentes indutores e as condições de cultivo foram otimizadas através de planejamento experimental para o aumento da produção dessa enzima. A beta -1,3-glucanase lítica foi purificada do sobrenadante do meio de cultura através de ultrafiltração (membrana de exclusão de 10 kDa), cromatografia de troca iônica em coluna de DEAE-Sepharose equilibrada em tampão acetato de sódio O,OIM, pH 5,5 e eletroforese em SDS-PAGE. A região N-terminal dessa proteína foi seqüenciada e o gene da beta -1,3-glucanase foi isolado do genoma de C. cartae 191. O gene que codifica essa enzima foi seqüenciado e clonado em células de Escherichia coli DH5a ...Observação: O resumo, na íntegra poderá ser visualizado no texto completo da tese digital

ASSUNTO(S)

celulase levedos

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