Detecção e localização de proteínas relacionados às MRJPs e de suas possíveis proteínas sítio-ligantes no cérebro e glândula hipofaringeal da abelha Apis mellifera

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2006

RESUMO

RESUMO GERAL As MRJPs são as principais proteínas hidrossolúveis da geléia real da abelha Apis mellifera L. Neste trabalho, detectou-se e imunolocalizou-se proteínas relacionados às MRJPs e suas possíveis proteínas sítio-ligantes no cérebro e glândula hipofaringeal da abelha Apis mellifera. Polipeptídeos de massa molecular de 57, 70 foram correlacionados às MRJP1 e MRJP3 e o polipeptídio de massa molecular de 128kDa um novo polipeptídeo possivelmente relacionado a essa família de proteínas foram encontrados nas regiões analisadas do cérebro dessa abelha. Alem disso, 21 peptídeos, gerados por phage displays, foram utilizados em bioinformática para analisar as regiões antigênicas da MRJP1, as quais se repetiram nas outras MRJPs analisadas, bem como localizar possíveis proteínas sítio-ligantes com as MRJPs no sistema nervoso da abelha. Esses resultados trazem uma importante contribuição para a compreensão do papel biológico desta interessante família de proteínas nos teciodo da abelha A. mellifera. RESUMO - CAPÍTULO I As principais proteínas da geléia real (MRJPs) são uma família única de proteínas da abelha Apis mellifera, as quais são altamente expressa na glândula hipofaringeal das abelhas operárias. Para identificar proteínas relacionadas às MRJPs no sistema nervoso destas abelhas, anticorpos foram imunopurificados e testados para revelar polipeptídeos que são reativos a estes anticorpos no cérebro e glândula hipofaringeal desta abelha. As identidades entre as seqüências das MRJPs foram analisadas por bioinformática, e a distribuição das MRJPs nestes tecidos foram testados imunohistoquimicamente. Dentre as espécies de himenópteros investigados somente a A. mellfiera mostrou reação cruzada dos polipeptídios com os anticorpos anti-MRJP1 e o anti-MRJPtotal. Três polipeptídios, p57, p70 e p128, foram detectados na cabeça, cérebro e glândula hipofaringeal desta abelha, apresentado diferenças entre castas, idade e regiões investigadas do cérebro. Esses resultados mostraram: a) O p57 foi o único polipeptídio imunoprecipitado pelo anti-MRJP1 sugerindo que esse polipeptídio pode estar relacionado com uma proteína específica do cérebro MRJP1; b) O p70, baseado na massa molecular relativa, pode estar relacionado com a MRJP3 e c) o p128 é um novo polipeptídio relacionado às MRJPs em regiões do cérebro da abelha e glândula hipofaringeal detectado com o anti-MRJP total e anti-MRJP1 mostrando a localização das MRJPs nas diferentes áreas como os corpos de cogumelo, lobos antenal e ópticos e com uma forte marcação na glândula hipofaringeal. Neste estudo, nós mostramos polipeptídios imunoreativos com anticorpos para as MRJPs no cérebro e glândula hipofaringeal da A. mellifera. A localização das MRJPs em regiões do cérebro pode contribuir para elucidar o papel biológico desta família de proteínas desta abelha. RESUMO - CAPÍTULO II As MRJPs são as principais proteínas hidrossolúveis da geléia real da abelha Apis mellifera L., com homologia restrita às proteínas Yellow descritas para Drosophila melanogaster. Os transcritos das MRJPs encontrados no cérebro da abelha operária e a localização das MRJPs em regiões específicas do cérebro da A. mellifera abriram perspectivas para o estudo de proteínas relacionadas às MRJPs no sistema nervoso da abelha. As regiões antigênicas da MRJP1 e a presença de proteínas sítio-ligantes com as MRJPs no cérebro da abelha foram investigadas a partir dos 21 peptídeos selecionados por Biopanning e gerados por phage display. O pool desses peptídeos foi usado como sonda para imunolocalizar proteínas sítio-ligantes com a MRJP1. Os sítios mapeados nessa proteína apresentaram-se repetidos em todas as outras MRJPs analisadas. Imunodetectou-se por Western blotting, das amostras dos fagos selecionados, os peptídeos imunoreativos que mimetizaram as regiões antigênicas da MRJP1. Imunolocalizou-se nos corpos de cogumelo, lobos ópticos e glândula hipofaringeal de todas as castas da abelha A. mellifera proteínas imunoreativas ao pool dos peptídeos gerados contra as MRJPs. Os resultados do presente estudo indicam a presença de proteínas sítio-ligantes com as MRJPs no sistema nervoso da abelha, sugerindo uma nova interação dessas proteínas com seus ligantes no cérebro da abelha A. mellifera.

ASSUNTO(S)

imunodetecção de polipeptídios geléia real imunolocalização royal jelly immunolocalization apis mellifera imunolocalização de polipeptídios mrjps genetica honeybee brain phage display cérebro da abelha phage display glândula hipofaringeal abelhas hypopharingeal gland honeybee

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