DetecÃÃo e localizaÃÃo de proteÃnas relacionados Ãs MRJPs e de suas possÃveis proteÃnas sÃtio-ligantes no cÃrebro e glÃndula hipofaringeal da abelha Apis mellifera

AUTOR(ES)

Leonardo Gomes Peixoto

DATA DE PUBLICAÇÃO

2006

RESUMO

RESUMO GERAL As MRJPs sÃo as principais proteÃnas hidrossolÃveis da gelÃia real da abelha Apis mellifera L. Neste trabalho, detectou-se e imunolocalizou-se proteÃnas relacionados Ãs MRJPs e suas possÃveis proteÃnas sÃtio-ligantes no cÃrebro e glÃndula hipofaringeal da abelha Apis mellifera. PolipeptÃdeos de massa molecular de 57, 70 foram correlacionados Ãs MRJP1 e MRJP3 e o polipeptÃdio de massa molecular de 128kDa um novo polipeptÃdeo possivelmente relacionado a essa famÃlia de proteÃnas foram encontrados nas regiÃes analisadas do cÃrebro dessa abelha. Alem disso, 21 peptÃdeos, gerados por phage displays, foram utilizados em bioinformÃtica para analisar as regiÃes antigÃnicas da MRJP1, as quais se repetiram nas outras MRJPs analisadas, bem como localizar possÃveis proteÃnas sÃtio-ligantes com as MRJPs no sistema nervoso da abelha. Esses resultados trazem uma importante contribuiÃÃo para a compreensÃo do papel biolÃgico desta interessante famÃlia de proteÃnas nos teciodo da abelha A. mellifera. RESUMO - CAPÃTULO I As principais proteÃnas da gelÃia real (MRJPs) sÃo uma famÃlia Ãnica de proteÃnas da abelha Apis mellifera, as quais sÃo altamente expressa na glÃndula hipofaringeal das abelhas operÃrias. Para identificar proteÃnas relacionadas Ãs MRJPs no sistema nervoso destas abelhas, anticorpos foram imunopurificados e testados para revelar polipeptÃdeos que sÃo reativos a estes anticorpos no cÃrebro e glÃndula hipofaringeal desta abelha. As identidades entre as seqÃÃncias das MRJPs foram analisadas por bioinformÃtica, e a distribuiÃÃo das MRJPs nestes tecidos foram testados imunohistoquimicamente. Dentre as espÃcies de himenÃpteros investigados somente a A. mellfiera mostrou reaÃÃo cruzada dos polipeptÃdios com os anticorpos anti-MRJP1 e o anti-MRJPtotal. TrÃs polipeptÃdios, p57, p70 e p128, foram detectados na cabeÃa, cÃrebro e glÃndula hipofaringeal desta abelha, apresentado diferenÃas entre castas, idade e regiÃes investigadas do cÃrebro. Esses resultados mostraram: a) O p57 foi o Ãnico polipeptÃdio imunoprecipitado pelo anti-MRJP1 sugerindo que esse polipeptÃdio pode estar relacionado com uma proteÃna especÃfica do cÃrebro MRJP1; b) O p70, baseado na massa molecular relativa, pode estar relacionado com a MRJP3 e c) o p128 Ã um novo polipeptÃdio relacionado Ãs MRJPs em regiÃes do cÃrebro da abelha e glÃndula hipofaringeal detectado com o anti-MRJP total e anti-MRJP1 mostrando a localizaÃÃo das MRJPs nas diferentes Ãreas como os corpos de cogumelo, lobos antenal e Ãpticos e com uma forte marcaÃÃo na glÃndula hipofaringeal. Neste estudo, nÃs mostramos polipeptÃdios imunoreativos com anticorpos para as MRJPs no cÃrebro e glÃndula hipofaringeal da A. mellifera. A localizaÃÃo das MRJPs em regiÃes do cÃrebro pode contribuir para elucidar o papel biolÃgico desta famÃlia de proteÃnas desta abelha. RESUMO - CAPÃTULO II As MRJPs sÃo as principais proteÃnas hidrossolÃveis da gelÃia real da abelha Apis mellifera L., com homologia restrita Ãs proteÃnas Yellow descritas para Drosophila melanogaster. Os transcritos das MRJPs encontrados no cÃrebro da abelha operÃria e a localizaÃÃo das MRJPs em regiÃes especÃficas do cÃrebro da A. mellifera abriram perspectivas para o estudo de proteÃnas relacionadas Ãs MRJPs no sistema nervoso da abelha. As regiÃes antigÃnicas da MRJP1 e a presenÃa de proteÃnas sÃtio-ligantes com as MRJPs no cÃrebro da abelha foram investigadas a partir dos 21 peptÃdeos selecionados por Biopanning e gerados por phage display. O pool desses peptÃdeos foi usado como sonda para imunolocalizar proteÃnas sÃtio-ligantes com a MRJP1. Os sÃtios mapeados nessa proteÃna apresentaram-se repetidos em todas as outras MRJPs analisadas. Imunodetectou-se por Western blotting, das amostras dos fagos selecionados, os peptÃdeos imunoreativos que mimetizaram as regiÃes antigÃnicas da MRJP1. Imunolocalizou-se nos corpos de cogumelo, lobos Ãpticos e glÃndula hipofaringeal de todas as castas da abelha A. mellifera proteÃnas imunoreativas ao pool dos peptÃdeos gerados contra as MRJPs. Os resultados do presente estudo indicam a presenÃa de proteÃnas sÃtio-ligantes com as MRJPs no sistema nervoso da abelha, sugerindo uma nova interaÃÃo dessas proteÃnas com seus ligantes no cÃrebro da abelha A. mellifera.

ASSUNTO(S)

cÃrebro da abelha phage display glÃndula hipofaringeal honeybee brain honeybee abelhas imunodetecÃÃo de polipeptÃdios gelÃia real imunolocalizaÃÃo hypopharingeal gland phage display apis mellifera imunolocalizaÃÃo de polipeptÃdios mrjps royal jelly immunolocalization genetica

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