Detecção do Cassava common mosaic virus por immunocaptura-RT-PCR em mandioca obtida por cultura de meristemas no estado do Paraná

AUTOR(ES)
FONTE

Tropical Plant Pathology

DATA DE PUBLICAÇÃO

2011-10

RESUMO

Em um levantamento conduzido na região noroeste do Paraná, principal região produtora de mandioca do estado, constatou-se que o CsCMV está amplamente disseminado, infectando mais de 90% das plantas de todas as cultivares. Um isolado do CsCMV foi purificado para a produção de um anti-soro policlonal de alto título (1/1000), o qual foi utilizado na indexação por meio de PTA-ELISA de plantas produzidas via cultura de meristemas. De uma produção inicial de 110 plantas da cultivar Olho Junto, 31 permaneceram infectadas como indicou o PTA-ELISA. Visando aumentar a sensibilidade de detecção do vírus, foi estabelecido um protocolo de IC-RT-PCR. A IgG purificada, específica para o vírus, combinada com um par de oligonucleotídeos universais para Potexvirus, prontamente detectou o CsCMV nos extratos obtidos de mandioca. Produtos de IC-RT-PCR de 750 pb foram amplificados a partir de seis de um total de 35 plantas previamente testadas como negativas para o CsCMV via PTA-ELISA. Os sequenciamentos confirmaram que os produtos de IC-RT-PCR são parte do gene codificador da replicase do CsCMV, indicando assim a presença do vírus mesmo após a termoterapia combinada com a cultura de meristemas. O PTA-ELISA permitiu a triagem preliminar de plantas vírus-positivas, possibilitando a redução do número de plantas a serem analisadas por IC-RT-PCR. Embora o CsCMV seja considerado de importância menor, o fato desse vírus estar disseminado na região noroeste do Paraná recomenda a adoção de medidas efetivas para o seu controle.

ASSUNTO(S)

potexvirus euphorbiaceae ic-rt-pcr indexação pta-elisa

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