Desenvolvimento de um biossensor para detecÃÃo e identificaÃÃo do vÃrus da dengue em fluÃdos biolÃgicos

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2006

RESUMO

A dengue, uma doenÃa emergente, à atualmente a mais importante arbovirose humana, manifestando-se na forma de quatro sorotipos relacionados antigenicamente (DENV 1-4). à endÃmica e / ou epidÃmica em todas as regiÃes tropicais e subtropicais, e uma ameaÃa potencial para regiÃes mais temperadas. Dos 100 milhÃes de casos anuais, 450000 correspondem à forma mais grave, hemorrÃgica, com alta letalidade. Devido à inespecificidade dos sintomas iniciais e à inexistÃncia de vacinas e drogas eficientes e devidamente testadas, o diagnÃstico precoce à a principal estratÃgia de sobrevivÃncia à dengue hemorrÃgica. As tÃcnicas laboratoriais de diagnÃstico clÃnico convencional, contudo, apresentam limitaÃÃes significativas. Com a tecnologia de biossensores produzem-se dispositivos simples, rÃpidos, baratos, sensÃveis, especÃficos e miniaturados para diagnÃstico descentralizado. Neste trabalho, desenvolveu-se um biossensor eletroquÃmico de DNA para detectar, por voltametria cÃclica, um oligonucleotÃdeo sintÃtico relacionado com o genoma do vÃrus da dengue, hibridizandoo especificamente com a sua seqÃÃncia complementar, imobilizada num eletrodo de carbono vÃtreo modificado com quitosana. O ferroceno foi usado como indicador eletroativo de hibridizaÃÃo por se ligar ao ssDNA e ao dsDNA com diferentes afinidades e, assim, gerar picos de corrente distintos. Este biossensor conseguiu discriminar significativamente o dsDNA do ssDNA, na gama de detecÃÃo de mg/ml (submicromolar). A maior afinidade relativa do ferroceno por dsDNA foi confirmada pela obtenÃÃo de maior constante de decaimento voltamÃtrico (kd) e menor perÃodo de meia-vida (t1/2) em relaÃÃo ao ensaio com ssDNA. A identificaÃÃo especÃfica do sorotipo deverà requerer somente substituiÃÃo da seqÃÃncia conservada (genÃrica) por seqÃÃncias especÃficas de cada sorotipo

ASSUNTO(S)

detecÃÃo eletroquÃmica hybridisation indicator diagnÃstico de dengue electrochemical detection dengue diagnosis ciencias biologicas indicador de hibridizaÃÃo dna biosensor biossensor de dna chitosan immobilisation. eletrodo de carbono vÃtreo glassy carbon electrode imobilizaÃÃo de quitosana

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