Comportamento biológico e caracterização molecular de infecção mista com clones de Trypanosoma cruzi ao longo de passagens alternadas entre hospedeiros invertebrado e vertebrado. / Comportamento biológico e caracterização molecular de infecção mista com clones de Trypanosoma cruzi ao longo de passagens alternadas entre hospedeiros invertebrado e vertebrado.

AUTOR(ES)
FONTE

IBICT - Instituto Brasileiro de Informação em Ciência e Tecnologia

DATA DE PUBLICAÇÃO

15/12/2011

RESUMO

Neste trabalho, foi avaliado o impacto das passagens alternadas pelos hospedeiros invertebrado, vertebrado e invertebrado nas propriedades biológicas e genéticas das populações de parasitos em infecção mista. Desta forma, um clone de T. cruzi representante da DTU TcI (P209 cl1) e outro da DTU TcII (CBB cl3) foram utilizados para constituir a infecção mista. Foram avaliados o estabelecimento e o desenvolvimento da infecção mista (TcI+TcII) no hospedeiro invertebrado (ninfas de terceiro estádio de Triatoma infestans), seguida de sua passagem pelo hospedeiro vertebrado (camundongo Swiss) e novamente pelo hospedeiro invertebrado (T. infestans). A primeira infecção dos triatomíneos (n=40) foi feita por xenodiagnóstico artificial (XAHI - primeira etapa) com 15x103 epimastigotas, em meio LIT, adicionado de sangue de camundongos. Após trinta dias, os insetos foram avaliados individualmente em relação ao número de flagelados por inseto (NFI), percentuais de infectividade (%INF) e percentuais de metaciclogênese (%DIF) e os resultados comparados com as infecções monoclonais (TcI ou TcII) correspondentes. Os parasitos isolados do XAHI foram utilizados para infectar artificialmente os hospedeiros vertebrados (n=16 camundongos Swiss), via IP com inóculo de 1x103 tripomastigotas metacíclicos, (IAHV segunda etapa). Neste hospedeiro a parasitemia e infectividade foram avaliadas por ESF, HC e PCR. Trinta dias após a infecção, os camundongos foram submetidos ao xenodiagnóstico natural (XNHI terceira etapa), e desse modo, outros triatomíneos foram infectados e avaliados pelos mesmos parâmetros utilizados na primeira etapa. A cada etapa, os reisolados do parasito foram caracterizados molecularmente pelo perfil eletroforético de Isoenzimas, gene rDNA 24Sα e RAPD. Na primeira etapa, a infecção mista por XAHI apresentou perfil de desenvolvimento similar ao de TcII em relação ao NFI e %INF, porém, para o %DIF os valores foram superiores do que o observado nas infecções monoclonais. A caracterização molecular revelou que a infecção mista estava presente em 100% das amostras originadas destes triatomíneos (XAHI). Na segunda etapa, apenas um camundongo do grupo infectado com infecção mista (TcI+TcII) apresentou parasitemia patente. Nos outros animais a infecção foi confirmada por HC e PCR, sendo esta última feita apenas nos animais com HC negativa. Os percentuais de animais infectados expostos à infecção mista, monoclonal (Tc I) e monoclonal (Tc II) foram de 62%, 44% e 19% respectivamente. A caracterização molecular de isolados provenientes de camundongos expostos à infecção mista demonstrou a presença de infecção mista (TcI+TcII) em 40% dos animais e nos outros 60% apenas a DTU TcI foi detectada. Na terceira etapa, os triatomíneos que se alimentaram nos animais com infecção mista apresentaram NFI, %INF e %DIF significativamente maiores do que o observado nos que se alimentaram em animais com infecções monoclonais. As análises moleculares revelaram apenas a presença de TcI nos triatomíneos que se alimentaram em animais expostos infecção mista por XNHI (terceira etapa). Após as passagens alternadas entre os diferentes hospedeiros foi observado que a mistura de populações de T. cruzi apresentou padrões biológicos distintos em relação às infecções monoclonais correspondentes, favorecendo a transmissão entre os hospedeiros. Entretanto, penas o grupo TcI foi detectado ao final de todas as passagens. Sendo assim os resultados sugerem que durante as passagens alternadas de infecções mistas, compostas por parasitos genética e biologicamente distintos, por diferentes hospedeiros, ocorre seleção de populações do T. cruzi, representando assim ―filtros biológicos‖, o que causaria impacto na sua transmissão e consequentemente na epidemiologia da doença de Chagas.

ASSUNTO(S)

protozoologia de parasitos

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