Avaliação de quatro detergentes utilizados para solubilização de proteínas de membrana de Xylela fastidiosa empregando eletroforese bidimensional

AUTOR(ES)

Di Ciero, Luciana, Bellato, Cláudia de M., Meinhardt, Lyndel W., Ferrari, Fernanda, Castellari, Rafael R., Marangoni, Sérgio, Novello, José C.

FONTE

Brazilian Journal of Microbiology

DATA DE PUBLICAÇÃO

2004-09

RESUMO

O objetivo deste trabalho foi comparar a eficiência da solubilização de quatro detergentes comercialmente disponíveis, ASB 14, SB 3-10, CHAPS e Triton X100, na extração de proteínas de membrana da bactéria Xylella fastidiosa para estudos proteômicos. Estas proteínas foram solubilizadas em duas etapas em tampões diferenciados pelos detergentes e submetidas à eletroforese bidimensional (2-DE) em uma faixa de pH não linear de 3-10. Os detergentes ASB 14 e SB 3-10 foram os mais efecientes, revelando 221 e 157 proteínas, respectivamente, enquanto que o CHAPS e o Triton X100 resultaram somente 72 e 43 proteínas, respectivamente. A identificação das proteínas foi feita por 'peptide mass fingerprinting' em espectrometria de massa MALDI-TOF, através de peptídeos obtidos por digestão com tripsina in gel. Os 18 spots de proteínas do gel com tratamento com ASB 14 mostrou que 83% eram proteínas de membrana. Este estudo concluiu que o detergente ASB-14 foi o mais eficiente na solubilização de proteínas de membrana de Xylella fastidiosa.

ASSUNTO(S)

bactéria proteoma solubilização eletroforese bidimensional

Documentos Relacionados

• Avaliação de quatro estratégias diferentes para caracterizar proteínas da membrana plasmática de raízes de banana
• Desenvolvimento de método de preparação de amostras para solubilização de proteínas de clara de ovo orgânico para aplicação em eletroforese.
• Eletroforese bidimensional e análise de proteomas
• Analise proteomica da Xylela fastidiosa e desenvolvimento de novo metodo para analise quantitativa de proteomas por espectrometria de massa
• Instrumento para avaliação de detergentes enzimáticos