Análise genética e dos fatores de virulência de isolados clínicos de Candida albicans de pacientes com periodontite crônica portadores de diabetes mellitus tipo II / Genetic analysis and virulence factors of clinical isolates of Candida albicans from patients with chronic periodontitis with diabetes mellitus type II

AUTOR(ES)

Janaina de Cassia Orlandi Sardi

FONTE

IBICT - Instituto Brasileiro de Informação em Ciência e Tecnologia

DATA DE PUBLICAÇÃO

11/06/2010

RESUMO

Candida spp. são leveduras comensais que habitam diferentes sítios da cavidade bucal. Em indivíduos saudáveis, sem alterações imunológicas, esses microrganismos não causam doença. Entretanto, diante de condições imunossupressoras, essas leveduras podem se tornar mais virulentas e expressar patogenicidade. Espécies de Candida apresentam diversos fatores de virulência, incluindo mecanismos de adesão e invasão celular associado à produção de enzimas que auxiliam na degradação tecidual e facilitam sua proliferação na mucosa bucal. Estudos têm demonstrado a presença de Candida sp. em sítios periodontais de pacientes com periodontite crônica, principalmente quando estes são imunologicamente comprometidos. Entretanto, ainda é desconhecido o papel desses microrganismos na patogênese da doença periodontal. Os objetivos do presente trabalho foram: 1) identificar a presença de espécies de Candida e periodontopatógenos por PCR em sítios bucais de pacientes diabéticos ou não com periodontite crônica; 2) isolar cepas de Candida albicans desses pacientes e avaliá-las quanto à atividade das enzimas proteinase, fosfolipase e hemolisina e os graus de hidrofobicidade da superfície celular, sob diferentes condições atmosféricas, além de realizar a análise genotípica desses isolados; 3) avaliar a capacidade de adesão e invasão de cepas de Candida albicans com diferentes graus de hidrofobicidade, em fibroblastos gengivais humanos. As reações de PCR mostraram que os diabéticos tiveram maior prevalência de Candida spp. principalmente C. albicans e C. dubliniensis, e menor freqüência de Tannerella forsythia, quando comparado aos pacientes não diabéticos, para bolsa periodontal e furcas. C. glabrata e C. tropicalis não foram encontradas em sítios periodontais de pacientes não diabéticos. Dos pacientes diabéticos, foram isoladas 128 cepas de C. albicans, das quais 51.6% foram determinadas como genótipo B e 48.4% como genótipo A. As condições ambientais consideradas neste estudo, níveis reduzidos de oxigênio ou anaerobiose, não modificaram o tipo de hemólise realizado pelo microrganismo, sendo que a maioria das cepas foi alfa–hemolítica. Nesses ensaios, 100% das cepas em anaerobiose apresentaram as colônias rugosas, enquanto que em ambiente de oxigênio reduzido, houve variação em relação à morfologia e a maioria delas apresentou colônia lisa. Com relação à atividade de proteinase e fosfolipase, cepas de C. albicans não produziram as enzimas na ausência total de oxigênio. Em ambiente com nível reduzido de oxigênio, a maioria das cepas de C. albicans foram fortemente produtoras de proteinase e a maioria das cepas foi positiva para fosfolipase. A hidrofobicidade foi mais alta na condição de anaerobiose. A partir desses resultados, foram selecionadas 16 cepas com alta ou baixa hidrofobicidade e avaliadas quanto à capacidade de adesão e invasão em fibroblastos gengivais humanos. Foi verificado que ambos os processos foram maiores nas cepas com alta hidrofobicidade. A produção de óxido nítrico foi maior para as cepas mais hidrofóbicas. Os resultados demonstraram que as espécies de Candida podem ser encontradas, em grande proporção, em bolsas periodontais e furcas de pacientes portadores de periodontite crônica, principalmente naqueles acometidos por diabetes mellitus. A maioria das cepas de C. albicans apresentou atividade enzimática, que atuaria diretamente na degradação tecidual. Além disso, a hidrofobicidade das cepas de C. albicans mostrou estar relacionada à maior capacidade de adesão e invasão em fibroblastos. Todos esses fatores de virulência aumentam a patogenicidade da Candida, que poderia colaborar na progressão da doença periodontal, principalmente em pacientes imunodeficientes.

ASSUNTO(S)

doença periodontal genótipo periodontal disease genotypes

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