Alterações morfofisiologicas celulares e nucleares em celulas epiteliais mamarias humanas transformadas por benzo [a] pireno e transfectadas com o oncogene c-Ha-ras : aspectos citoquimicos e de analise de imagem

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

1997

RESUMO

Alterações morfofisiológicas celulares enucleares foram investigadas através de métodos citoquímicos e de análise de imagem em células epiteliais mamárias humanas, MCF-IOF, transformadas com o benzo[a]pireno, e que expressam diferentes estágios da progressão tumoral (clones BPl, BPI-E e BPI-El), e, adicionalmente, num clone transfectado com o oncogene c-Ha-ras (BPl- Tras). Um aumento no índice mitótico foi observado com a progressão neoplásica. Por outro lado, um aumento em células apoptóticas, evidenciadas por uma variante do método de concentração crítica de eletrólitos, foi observado somente nas células BPI-Tras. Relocação de RNA durante a mitose, identificável por resposta metacromática, não diferiu quando se compararam células MCF-lOF transformadas e não transformadas, exceto com relação à presença de corpos semelhantes a nucléolos ("nucleolus-like bodies") encontrados próximos à placa cromossômica na metáfase ou ao fuso nas fases mitóticas subsequentes. Estes corpos não foram abundantes nas células MCF-lOF não transformadas e se tornaram mais escassos ainda nos clones celulares transformados, talvez por menores quantidades de RNA excedentes estarem envolvidas em tais condições. Pleomorfismo nuclear foi predominante nos clones celulares que expressam o fenótipo tumorigênico (BPI-E, BPI-El e BPI-Tras). Anormalidades nucleares tais como, cariorréxis, cariólise, multinucleação e micronúcleos foram mais freqüentes nas células BPl- Tras. Todos os clones exibiram células binucleadas e gigantes, mas nenhuma alteração nas suas frequências puderam ser detectadas quando os vários clones celulares foram comparados entre si. Alguns fenótipos nucleares puderam ser caracterizados nas células transformadas e não transformadas. Entretranto, estes poderiam estar associados com a progressão neoplásica, ou mesmo, com as diferentes fases do ciclo celular. Uma diminuição na área, perímetro e fator forma nucleares, mas um aumento na área e perímetro nucleolares foram encontrados com o avanço do processo tumorigênico nas células transformadas com o benzo[a]pireno. Estas alterações podem ser devidas a uma diminuição nas quantidades Feulgen-DNA (hipodiploidia) e/ou a um aumento nos estados de empacotamento cromatínico, embora um aumento na atividade transcripcional ocorra a nível nucleolar. Em particular, os tamanhos e perímetros nucleares das células BPl- Tras aumentaram quando comparados aos das células BP1, BPI-E e BPI-El, mas não diferiram dos valores para células MCF-IOF não transformadas. O aumento na área e no perímetro nuclear pode estar associado a uma certa aneuploidia promovida pela transfecção com o oncogene c-Ha-ras. Os tamanhos e número de nucléolos nas células BPI-E e BPI-Tras diferiram dos das outras células, e, um aumento da tamanho nucleolar com uma diminuição do número de nucléolos foi observado ocorrer nas células BPI-E e BPI-Tras. Fusão nucleolar e aumento em tamanho certamente refletem atividades metabólicas aumentadas nas células BPI-E e BP1 Tras quando comparadas aos outros clones celulares. Os dados de morfometria nuclear nos clones celulares transformados pelo benzo[a]pireno e transfectados com o oncogene c-Ha-ras indicam a existência de mecanismos morfofuncionais distintos e complexos que envolvem a progressão neoplásica de células MCF-lOF in vitro. O aumento na frequência de células micronucleadas e multinucleadas e aneuploidia nas células BP 1- Tras poderia estar relacionado à instabilidade genética induzida pela transfecção do oncogeneraso

ASSUNTO(S)

citoquimica biologia celular

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