Um Simples Kit de "Enzyme-Linked Immunosorbent Assay" para Identificação de Vírus de Planta
AUTOR(ES)
Nascimento, Aline Kelly Queiróz, Lima, José Albersio Araújo, Barbosa, Graziela da Silva
FONTE
Rev. Ciênc. Agron.
DATA DE PUBLICAÇÃO
2017-03
RESUMO
RESUMO Muitos métodos podem ser utilizados para uma correta diagnose de doenças ocasionadas por vírus, e os métodos sorológicos são os mais utilizados. O teste de ELISA "enzyme-linked immunosorbent assay" indireto ou placa tratada com antígeno (PTA-ELISA) é realizado para detecção de vírus em várias situações, especialmente para testes de elevado número de amostras em curto período de tempo. Empresas que comercializam imunobiológicos têm desenvolvido kits práticos de ELISA direto ou ELISA sanduíche duplo (DAS-ELISA), mas nenhuma delas desenvolveu kits de ELISA indireto ou PTA-ELISA. Como um anticorpo universal conjugado a uma enzima é usado na técnica de PTA-ELISA para detecção de vasta gama de vírus, PTA-ELISA é a técnica mais econômica, prática e adequada. Considerando também o problema da inclusão de vírus como controle positivo em kits comerciais de DAS-ELISA, um kit sorológico de PTA ELISA foi desenvolvido para identificação de vírus de planta. Extratos de tecidos infetados foram adicionados a poços de placas de ELISA, que após lavagem e secagem foram seladas com adesivo plástico e mantidas em refrigerador e em condições de laboratório por diferentes períodos. Após 20 meses de incubação, as placas do kit mostraram excelentes resultados na detecção de seis espécies de vírus dos gêneros Comovirus, Cucumovirus, Potyvirus e Sobemovirus. Placas de ELISA previamente tratadas com vírus, juntamente com antissoros específicos podem constituir um kit de PTA-ELISA, que proporcionará eficiente diagnose de viroses vegetais e permitirá permuta de antissoros entre grupos científicos sem a transferência de vírus infectivo de um laboratório para outro.
ASSUNTO(S)
diagnose de viroses de planta elisa comovirus cucumovirus potyvirus sobemovirus
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