Transformação genética do fungo entomopatogênico Beauveria bassiana via Agrobacterium tumefaciens
AUTOR(ES)
Maria Cecília dos Reis
DATA DE PUBLICAÇÃO
2004
RESUMO
A metodologia de transformação genética mediada pela bactéria Agrobacterium tumefaciens (agro-transformação) foi aplicada com sucesso para o fungo entomopatogênico Beauveria bassiana. Conídios de B. bassiana foram transformados utilizando-se o gene hph de Escherichia coli que confere resistência ao antibiótico higromicina B como marcador seletivo, sob controle de promotores heterólogos e a seqüência de término trpC de Aspergillus nidulans. A eficiência de transformação foi de até 28 e 96 transformantes por 104 e 105 conídios alvos, respectivamente, utilizando três vetores binários distintos. Alta estabilidade mitótica dos transformantes (80-100%) foi observada após 5 passagens sucessivas em meio não seletivo. A ocorrência de transformantes abortivos foi observada para todos os vetores binários utilizados. Os transformantes foram analisados quanto a presença do gene hph por PCR e Southern blot. A análise de Southern revelou a ocorrência de integração de mais de uma cópia do gene hph no genoma dos transformantes. O método de agro-transformação foi efetivo na obtenção de transformantes de B. bassiana resistentes à higromicina, possibilitando seu emprego em estudos de mutagênese insersional neste fungo.
ASSUNTO(S)
agrobacterium aspergillus fungos entomopatogênicos microbiologia agrobacterium aspergillus microbiology
ACESSO AO ARTIGO
http://189.90.64.145/document/?code=vtls000102880Documentos Relacionados
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