The influence of aging on the modulation of periodontal ligament cells response induced by basic fibroblast growth factor (bFGF) / Influencia do fator idade na modulação da resposta de celulas do ligamento periodontal induzida pelo fator de crescimento basico de fibroblastos (bFGF)

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

2007

RESUMO

O objetivo deste trabalho foi investigar a influência do fator idade sobre o comportamento e expressão gênica de células do ligamento periodontal (CLPD), e quais alterações o tratamento com fator de crescimento básico de fibroblastos (bFGF) pode induzir nestas populações celulares. Culturas primárias de CLPD foram obtidas e divididas nos seguintes grupos experimentais: A ? inclusos (células obtidas de terceiros molares inclusos de voluntários entre 18 e 30 anos de idade), B ? jovens (células obtidas de pré-molares erupcionados de voluntários entre 15 e 20 anos de idade), C ? idosos (células obtidas de dentes erupcionados de voluntários acima de 60 anos de idade), D ? grupo A submetido ao tratamento com 10?g/ml de bFGF, E ? grupo B submetido ao tratamento com 10?g/ml de bFGF e F ? grupo C submetido ao tratamento com 10?g/ml de bFGF. Foram realizados ensaios de proliferação e viabilidade celular, mineralização, quantificação dos níveis de proteína total e do padrão de expressão dos seguintes genes: Colágeno tipo I e III, metaloproteinase (MMP)-2 e -8, inibidor tecidual de metaloproteinase (TIMP)-1 e ?2, fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGF)-1, proteína morfogenética óssea (BMP)-3, bFGF, osteoprotegerina (OPG), receptor ativador do fator nuclear k? ligante (RANKL), interleucina (IL)-1?, IL-4, IL-6, IL-8 e receptor de fator de crescimento de fibroblasto (FGFR) 1 por meio da técnica de ?real-time? PCR (PCRq). A análise dos resultados demonstrou que a idade diminuiu a taxa de proliferação celular e a formação de nódulos minerais (P<0,05), enquanto que não se observou efeito significativo da idade sobre a viabilidade celular e quantidade total de proteína secretada (P>0,05). Já na análise de expressão gênica observou-se que a idade diminuiu significativamente os níveis de RNAm para colágeno tipo I e IL-4, enquanto que para os genes FGFR1, MMP-8, TIMP-1, OPG e IL-1? e 6, observou-se um aumento nos níveis de RNAm (P<0,05). O tratamento com 10?g/ml de bFGF aumentou a taxa proliferativa em todos os grupos (P<0,05), entretanto com menor intensidade nas células de idosos (P<0,05). Já a formação de nódulos minerais foi inibida pelo fator crescimento em todos os grupos experimentais (P<0,05), enquanto que a viabilidade celular e quantidade total de proteína secretada não foram afetadas (P>0,05). Na avaliação do padrão de expressão gênica, os resultados demostraram que o tratamento com bFGF, diminuiu nos níveis de RNAm para todos os genes (P<0,05), com excessão da TIMP-1 e IL-8 que aumentaram (P<0,05), BMP-3 que aumentou nas células de jovens e diminui nas células de idosos (P<0,05), e PDGF-1 que não foi afetada (P>0,05). Dentro dos limites do estudo, podemos concluir que: i) foi possível estabelecer culturas primárias de células do ligamento periodontal obtidas de pacientes jovens e idosos, ii) a idade pode modular propriedades importantes das CLPD, diminuindo seu potencial de regeneração de estruturas minerais além de exacerbar características pró-inflamatórias e de degradação da matriz extracelular e iii) o tratamento com 10?g/ml de bFGF induz alterações similares no comportarmento de CLPD independentemente da idade do doador

ASSUNTO(S)

aging periodontium envelhecimento periodonto

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