Supressão da resposta do HIF-1a pelo NF-kB via competição pela ligação com o coativador transcricional p300

AUTOR(ES)
FONTE

IBICT - Instituto Brasileiro de Informação em Ciência e Tecnologia

DATA DE PUBLICAÇÃO

01/09/2010

RESUMO

A hipóxia tem sido considerada um determinante chave do processo de osteogênese. O fator induzível por hipóxia 1.. (HIF-1..) é um fator de transcrição mediador da resposta à hipóxia que leva à indução do fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) e também de fatores de crescimento relacionados ao tecido ósseo. Sinais inflamatórios antagonizam o reparo ósseo pela via do fator nuclear kappa B (NF-..B). O presente trabalho avaliou a relação funcional da hipóxia (função do HIF-1..) e a sinalização inflamatória (NF-..B) em linhagens de células indiferenciadas e osteoprogenitoras. A possível interação entre as vias do HIF-1.. e NF-..B foi avaliada em estudos de co-transfecção com plasmídeos de expressão dos genes p65 e HIF-1.. e plasmídeos repórteres 9x-HRE-luc ou genes alvos do HIF-1. em células hFOB. A interação dentro do núcleo foi testada utilizando o sistema twohybrid de mamíferos com Gal4/VP16, e posteriormente confirmada por ensaios de co-imunoprecipitação e western blotting. Os resultados demonstraram que o estímulo inflamatório (tratamento com o fator de necrose tumoral . TNF-..) causou uma inibição significativa da função do HIF-1.. no sítio de elementos responsivos à hipóxia (HRE) em células da linhagem osteoblástica. Células co-transfectadas com o vetor de expressão do p65 também apresentaram uma diminuição na atividade do promotor do gene hVEGF após indução da hipóxia com o agente mimético de hipóxia desferroxamina (DFO). Entretanto, o tratamento com TNF-.. ou superexpressão do NF-..B através de plasmídeos ou vírus teve pouco efeito nos níveis de proteína ou mRNA e também não afetou a translocação do HIF- 1.. para o núcleo da célula. A interação funcional das proteínas de fusão Gal4-HIF-1.. e VP16- p300 foi bloqueada efetivamente pela expressão do p65 de uma maneira dose...dependente. Conclui-se que a sinalização inflamatória mediada pelo NF-..B é capaz de bloquear a transativação do HIF-1.. nos sítios HRE dos genes que respondem ao HIF-1.. através de uma competição direta pela ligação ao p300. A inflamação pode influenciar o nicho de células-tronco e a regeneração tecidual por interferir com a resposta das células à hipóxia.

ASSUNTO(S)

genetica ossos crescimento inflamação biotecnologia osteogênese bone repair, inflammation, hypoxia, p300 inflammation hypoxia

ACESSO AO ARTIGO

Documentos Relacionados