Successful amplification of mitochondrial DNA from dentin of the bottlenose dolphin Tursiops truncatus

AUTOR(ES)

Weber, Laura Isabel, Luca, Michelle Jaccottet de, Barreto, André Silva, Souza, Tiago Tolentino de

FONTE

Brazilian Archives of Biology and Technology

DATA DE PUBLICAÇÃO

2007-01

RESUMO

Vinte e quatro amostras de material dentário de Tursiops truncatus oriundas da coleção do Laboratório de Mamíferos Marinhos (FURG-RS) foram avaliadas para determinar seu potencial como fonte de DNA para estudos genético-populacionais e sistemáticos. Todos os dentes foram submetidos a processos de desinfecção, trituração e desmineralização. A dentina obtida foi pesada previamente à extração de DNA, a qual foi avaliada através da amplificação de dois genes mitocondriais, através da técnica de PCR (Reação em Cadeia da Polimerase), utilizando oligonucleotídeos iniciadores universais. Obteve-se sucesso apenas na amplificação do gene Citocromo-b. Destes produtos obtiveram-se concentrações de 3-12 ng/µl para o material dentário, observando-se uma relação linear positiva com a quantidade em gramas utilizada na extração de DNA. Com o objetivo de eliminar a possibilidade de contaminação foi realizada uma análise SSCP (Polimorfismo Conformacional de Fita Simples) incluindo os controles positivos e amostras de pessoas envolvidas nas análises. Os padrões SSCP de T. truncatus obtidos diferiram das outras amostras, observando-se polimorfismo na região para os exemplares de T. truncatus analisados. Concluiu-se que é possível obter DNA mitocondrial para estudos genético-populacionais e taxonômicos a partir de material dentário de golfinhos.

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