Relação entre o efeito citotoxico de biocompostos sobre linfocitos T e atividade de fosfatases

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

2003

RESUMO

O objetivo deste trabalho foi relacionar o efeito citotóxico do ácido okadáico um potente e específico inibidor de serinaJtreonina fosfatase (PP1 e PP2A) e trans-desidrocrotonína, um 19-nor-clerodane, é o maior norditerpeno obtido da croton Cajucara; uma planta medicinal brasileira, a qual apresenta importante atividade bíologica como antineoplásica e antiulcerigênica sobre a cultura primária de linfócitos humanos com a atividade de fosfatases. Primeiramente, a fosfatase total foi caracterizada cineticamente através dos seguintes estudos: efeitos de substrato, pH, potenciais inibidores, metais e outros compostos. Nossos resultados mostraram que a fosfatase predominante nos linfócitos trata-se de uma proteína tirosina fosfatase, uma vez que hidrolisou eficientemente tirosina fosfato (60%), foi fortemente inibida pelo pervanadato (100%), vanadato (80%), p-cloromercuribenzoato (90%), coquetel inibidor de proteína tirosina fosfatase (70%) e apresentou insensibilidade ao ácido okadáico (100 nM). Nos estudos de citotoxicidade avaliamos o efeito do ácido okadáico e da desidrocrotonina, através dos seguintes parâmetros: redução do MTT (integridade mitocondrial), conteúdo total de proteínas (número de células) e atividade fosfatásica (metabolismo celular). Nos testes de citotoxicidade o ácido okadáico e a desidrocrotonina (na ausência do mitogêno) apresentaram efeito tóxico sobre linfócitos humanos quando analisados os parâmetros fosfatase e MTT com valores de ICso 47 e 100nM para o ácido okadáico; 450 fJM para a desidrocrotonina. O efeito mitogênico do OKA (10nM) sobre os linfócitos foi detectado 10 min após o tratamento com este composto, o qual causou aumento de 30% no número de células, este efeito foi inibido na presença da desidrocrotonina. Quando avaliamos o efeito da desidrocrotonina na CD45 purificada observamos uma inibição significativa. Este composto apresenta ação oxidante, portanto a inibição da fosfatase por estes compostos pode ser devido a formação de adutos. Os resultados obtidos neste estudo indicam que a PTP presente nos linfócitos pode servir de forma complementar, como um parâmetro de viabilidade celular e nos fornecer informações importantes sobre o metabolismo celular

ASSUNTO(S)

agentes antineoplasicos linfocitos fosfatases

ACESSO AO ARTIGO

Documentos Relacionados