Reação em cadeia pela polimerase (PCR) para detecção de Salmonella em carne de frango artificialmente contaminada
AUTOR(ES)
SANTOS, Luciana Ruschel dos, NASCIMENTO, Vladimir Pinheiro do, OLIVEIRA, Sílvia Dias de, FLORES, Maristela Lovato, PONTES, Alexandre Pontes, RIBEIRO, Aldemir Reginato, SALLE, Carlos Tadeu Pippi, LOPES, Rui Fernando Félix
FONTE
Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo
DATA DE PUBLICAÇÃO
2001-10
RESUMO
O objetivo deste trabalho foi adequar um protocolo de reação em cadeia pela polimerase (PCR) para detecção de Salmonella em carne de frango artificialmente contaminada. Foram realizados ensaios com amostras de carne de frango inoculadas com diluições de Salmonella Typhimurium ou Salmonella Enteritidis (10-7, 10-8 ou 10-9 UFC/mL), procurando-se determinar o limite de detecção da técnica, intervalos de incubação das amostras (0, 6, 8 ou 24 horas de pré-enriquecimento em água peptonada 1%) e três protocolos de extração de DNA (fenol-clorofórmio, tratamento térmico ou tratamento térmico e Sephaglass). Foi possível amplificar DNA de Salmonella nas amostras de carne de frango inoculadas inicialmente com diluições de até 10-9 UFC/mL, utilizando-se protocolo de extração de DNA por fenol-clorofórmio e após um período de 24 horas de pré-enriquecimento, totalizando 48 horas de análise. Como os resultados são obtidos mais rapidamente que a cultura, este procedimento será útil na metodologia para detecção de Salmonella em carne de frango.
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