Precipitação de miosinas IIA e IIB de rim por congelamento

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2010

RESUMO

Miosinas são ATPases que realizam trabalho celular translocando-se sobre microfilamentos de actina. Constituem uma superfamília com mais de 20 classes. São amplamente distribuídas em todas as células eucarióticas. Algumas são conhecidas apenas a estrutura primária através de seqüência gênica, outras como proteínas expressas através de sistemas recombinantes. Algumas dessas miosinas já foram purificadas como proteínas nativas e encontram-se bem caracterizadas bioquimicamente, como as miosinas I, II, V e VI. Apresentam como características bioquímicas: atividade ATPase na presença de EDTA e alta concentração de potássio (atividade K/EDTA-ATPase) e uma baixa atividade Mg-ATPase, que é altamente estimulada por F-actina. A precipitação de actomiosina é um passo importante para a purificação de miosinas nativas. Preparação de actomiosina é obtida a partir da precipitação de fração solúvel de cérebro tanto em baixa quanto em alta força iônica e esse processo de precipitação permite a purificação de miosina II ou V. É postulado que essa precipitação de miosina (II ou V) seja resultado de sua interação com actina e vesículas. Temos obtido a precipitação de actomiosina a partir do congelamento de fração solúvel de cérebro ou testículo de rato. Neste trabalho mostramos a purificação de miosina IIA e IIB de rim, partindo de actomiosina precipitada através do congelamento de fração solúvel.

ASSUNTO(S)

miosinas genetica proteínas

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