Poliaminas no cérebro do rato: validação de método analítico

AUTOR(ES)

Sampaio, Valdomiro de Freitas, Padovan, Gilberto J., Marchini, Julio Sérgio, Oliveira, Luiz Marcellino de, Almeida, Sebastião Sousa

FONTE

Jornal Brasileiro de Patologia e Medicina Laboratorial

DATA DE PUBLICAÇÃO

2010-12

RESUMO

A validação técnica analítica para determinação de poliaminas em tecido cerebral utilizando cromotografia líquida de alta eficiência (HPLC) e derivação pós-coluna com o-ftaldialdeído é descrita. A separação das poliaminas deu-se em coluna LiChrospher 100 RP18. O gradiente de eluição foi formado por duas fases móveis A (acetato de sódio 0,1M + octanossulfonato de sódio 0,01 M) e B (acetato de sódio 0,2 M + octanossulfonato de sódio 0,01 M)/acetonitrila (10:3), fluxo de 1,2 ml/min. O eluente foi monitorado por fluorescência (excitação, 345 nm; emissão, 455 nm). Além da excelente linearidade (putrescina, r = 0,9816; espermidina, r = 0,9920; espermina, r = 0,9901), a técnica demonstrou adequada precisão intra e interdia (< 20%) e recuperação (espermidina = 92,56%; espermina = 84,47%). Os limites de quantificação foram 0,22 pM para putrescina, 76,44 pM para espermidina e 51,44 pM para espermina. O método demonstrou ser consistente, simples e altamente reprodutível para a determinação proposta.

ASSUNTO(S)

validação técnica analítica hplc poliaminas

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