Partição do glicomacropeptídeo usando sistemas aquosos bifásicos / Partition of glycomacropeptide in aqueous two-phase systems

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2007

RESUMO

Neste trabalho, estudou-se a aplicação da extração líquido-líquido para a separação do glicomacropeptídeo (GMP), utilizando sistemas aquosos bifásicos (SAB) compostos por polietileno glicol (PEG) e um sal inorgânico. Esta técnica pode ser usada para purificação de biocompostos em larga escala pela possibilidade de partição seletiva com altos rendimentos. O comportamento da partição do GMP em SAB foi verificado estudando a influência do tipo de sal (fosfato de potássio, citrato de sódio, sulfato de lítio e sulfato de sódio), massa molar do polímero (PEG1500, PEG2000 e PEG4000), adição de cloreto de sódio, valor de pH, concentração das fases e temperatura do sistema, a fim de se obter o melhor sistema para a separação da biomolécula. Nestes ensaios foi obtido o coeficiente de partição do GMP entre a fase aquosa superior (PEG) e a fase aquosa inferior (sal). Observou-se que a proteína migrou predominantemente para a fase superior, rica em PEG, onde os contaminantes não protéicos presentes na fase são o PEG e uma pequena quantidade de sal, que podem ser removidos da proteína alvo por meio de uma técnica cromatográfica, como a cromatografia de exclusão molecular (CEM). Entre os sistemas avaliados e em razão das características nãotóxicas e biodegradáveis do citrato, o sistema de extração que proporcionou as melhores condições foi o constituído por PEG1500 na concentração de 15 % em massa e citrato de sódio na concentração de 18,91 % em massa, em pH 8,0 e na temperatura de 318,15 K. Foram encontrados valores de coeficientes de partição para esse sistema acima de 30, sendo que aproximadamente 94,66 % do GMP foi recuperado na fase superior, o que indica uma boa separação. Em adição, parâmetros termodinâmicos (ΔH◦, ΔS◦, ΔG◦) em função da temperatura do sistema, foram calculados para o sistema formado por PEG1500 e citrato de sódio em diferentes concentrações de PEG. Os resultados exibiram diferenças termodinâmicas para a partição do GMP nos diversos sistemas avaliados. Este estudo mostrou claramente que o sucesso do uso do SAB para a recuperação e purificação inicial do GMP.

ASSUNTO(S)

sistemas aquosos bifásicos caseinomacropeptídeo aqueous two-phase systems bio- separações bio- separation tecnologia de alimentos caseinmacropeptide

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