Otimização de um método para extração de DNA genômico a partir de folhas de morangueiro
AUTOR(ES)
Nunes, Claudinéia Ferreira, Ferreira, Juliano Lino, Fernandes, Mônique Carolina Nunes, Breves, Sâmera de Souza, Generoso, Andressa Leal, Soares, Bárbara Dantas Fontes, Dias, Mário Sérgio Carvalho, Pasqual, Moacir, Borem, Aluízio, Cançado, Geraldo Magela de Almeida
FONTE
Ciência Rural
DATA DE PUBLICAÇÃO
2011-08
RESUMO
Vários métodos de extração de DNA genômico para a identificação e caracterização da diversidade genética em diferentes espécies de plantas são rotineiramente aplicados durante a análise molecular. Entretanto, a presença de compostos indesejáveis, tais como polifenóis e polissacarídeos, é um dos maiores problemas que ocorrem durante o isolamento e purificação de DNA de alta qualidade em plantas. Dessa forma, o sucesso no desenvolvimento de métodos de extração de DNA rápidos e acurados é crucial para produzir amostras puras. Folhas de genótipos de morangueiro (Fragaria ananassa) têm elevado conteúdo de polissacarídeos e polifenóis que aumentam a viscosidade da amostra e reduzem a qualidade do DNA, interferindo no desempenho da PCR. Neste estudo, avaliamos a qualidade e a quantidade de DNA genômico extraído de folhas jovens de morangueiro após a liofilização do tecido e a maceração na presença de polivinilpirrolidona (PVP). O método CTAB foi utilizado como procedimento de referência e foi modificado para melhorar a extração do DNA. As modificações consistiram na liofilização do tecido a baixa temperatura até que ele tivesse sido desidratado completamente, associada à adição de PVP durante a maceração do tecido no nitrogênio líquido. Os resultados demonstraram a eficiência e a confiabilidade do método modificado comparado ao método não modificado, indicando que a combinação da liofilização com PVP melhora a qualidade e quantidade do DNA extraído de folhas de morangueiro.
ASSUNTO(S)
fragaria ananassa dna genômico polivinilpirrolidona liofilização pcr
Documentos Relacionados
- Avaliação de um protocolo de extração de DNA genômico a partir de sangue total.
- Metodologia alternativa para extração de DNA genômico de Staphylococcus aureus
- Validação e otimização de protocolo simplificado para extração de DNA a partir de tecido foliar.
- EXTRAÇÃO DE DNA GENÔMICO DE Passiflora spp. PARA ANÁLISES PCR-RAPD
- Protocolos para extração de DNA genômico de amostras de pêlo de bovinos.