Osmosedimetação : aplicação analitica e preparativa a soluções macromoleculares

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

1984

RESUMO

A sedimentação de macromoléculas em solução, sob gravidade é um processo extremamente lento, impossibilitando a determição de parâmetros importantes que caracterizam o sistema no estado de equilíbrio de sedimentação-difusão. Este trabalho propõe um método analítico e preparativo - a osmossedimentação - baseado no efeito de aceleração da sedimentação de macromoléculas em solução, observado quando se permite um acoplamento osmótico ao sistema, isto é, quando a solução em estudo é colocada em contato com o respectivo solvente através de uma membrana semipermeável. Assim, demonstrou-se o alcance do equilíbrio de sedimentação difusao de dextrana T 500 (Mw = 5 x 10) e dextrana D 5376 (Mw = 2 x 10) em tempo muito curto (10 horas) comparado com o necessário para sedimentação não acoplada (53 anos). Parâmetros físico-químicos determinados a partir de gradientes de concentração no equilíbrio, tais corno peso molecular de dextrana e tiroglobulina, foram compatíveis com valores conhecidos na literatura e/ou obtidos por métodos convencionais, comprovando a eficiência da osmossedimentação como método analítico. O mesmo método permitiu a determinação de temperatura q, parâmetro de Flory-Huggins (X) e coeficiente de virial (A2) a várias temperaturas para diferentes amostras de dextrana. A aplicação preparativa da osmossedimentação foi investigada, concentrando-se soluções de dextrana D 5376 a 2000 rpm. Por exemplo, centrifugou-se uma solução 0,85% de dextrana durante 8 horas, acumulando-se 63% da dextrana em solução na quinta parte inferior da célula de osmossedimentação, enquanto que somente 20% da dextrana se localizaram na quinta parte inferior da célula osmoticamente acoplada. O fracionamento de dextrana polidispersa foi estudado em células de 1 metro de altura, sob gravidade, com um volume de solução de 1,2 l. Com a análise dos valores de Mw correspondentes a cada uma das oito frações retiradas da célula observou-se uma variação de peso molecular entre 0,7 x 10 e 2,1 x 10 do topo ao fundo da célula, mostrando a viabilidade do fracionamento de macrossolutos por osmossedimentação.

ASSUNTO(S)

solução (quimica) macromoleculas

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