Optimization of the PCR technique for detection of Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli in bean seeds / OTIMIZAÃÃO DA TÃCNICA DE PCR PARA DETECÃÃO DE Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli EM SEMENTES DE FEIJÃO
AUTOR(ES)
Franklin Cordeiro Silva
DATA DE PUBLICAÇÃO
2008
RESUMO
O crestamento bacteriano comum, causado por Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli (Xap), Ã a principal bacteriose do feijoeiro no Brasil, sendo transmitida principalmente por sementes. O presente trabalho foi realizado com o objetivo de aperfeiÃoar uma tÃcnica para detecÃÃo de Xap em sementes de feijÃo, por meio da utilizaÃÃo de diferentes mÃtodos de preparaÃÃo do extrato para a detecÃo via PCR, alÃm da detecÃÃo simultÃnea de Xap e Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens (Cff) nos extratos, utilizando a Bio-PCR. ApÃs a inoculaÃÃo das sementes de feijÃo, foram avaliados: extrato bruto, obtido diretamente das sementes, extrato concentrado em membrana milipore, extrato concentrado por centrifugaÃÃo e extrato plaqueado em meio seletivo (Bio-PCR). Avaliou-se a presenÃa de Xap e de Cff, em lotes comerciais de feijÃo provenientes de diversas regiÃes do Brasil, utilizando-se os mesmos procedimentos das sementes inoculadas. Para a otimizaÃÃo da tÃcnica de PCR, foram utilizados os primers X4c e X4e. A partir do extrato bruto, do extrato concentrado por centrifugaÃÃo e por membrana milipore, nÃo foi possÃÂvel a detecÃÃo de Xap nas sementes de feijÃo artificialmente contaminadas nem nos 47 lotes comerciais de sementes/grÃos de feijÃo. A tÃcnica de Bio-PCR permitiu a detecÃÃo de Xap a partir de extratos de sementes de feijÃo artificialmente contaminadas e em 18 dos 47 comerciais. A tÃcnica de detecÃÃo simultÃnea de Xap e Cff no mesmo gel nÃo foi viÃvel, por amplificar fragmentos de DNA tÃÂpicos de Cff na amostra controle Xap. O meio de cultura semi-seletivo XCP1 sem antibiÃticos pode ser utilizado para a recuperaÃÃo de colÃnias de Xap.
ASSUNTO(S)
ACESSO AO ARTIGO
http://bibtede.ufla.br/tede//tde_busca/arquivo.php?codArquivo=1494Documentos Relacionados
- Otimização da técnica de PCR para a detecção de Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli em sementes de feijão
- DESENVOLVIMENTO DE PRIMERS PARA DETECÃÃO DE Xanthomonas axonopodis pv. malvacearum
- Identificação de xanthomonas axonopodis pv. phaseoli e x. axonopodis pv. phaseoli var. fuscans através da técnica de pcr
- Detection of xanthomonas axonopodis pv. phaseoli in bean seeds by flow cytometry, immunostaining and direct viable counting.
- Inoculation and detection of Xanthomonas axonopodis pv. malvacearum in cotton seeds (Gossypium hirsutum L.)
