Invasão de hepatócitos de rato por Listeria monocytogenes e análise do papel do TNF-alfa na apoptose
AUTOR(ES)
Santos, Sânia Alves dos, Andrade, Dahir Ramos de, Andrade Júnior, Dahir Ramos de
FONTE
Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo
DATA DE PUBLICAÇÃO
2005-04
RESUMO
Listeria monocytogenes, agente etiológico de infecção grave de origem alimentar, utiliza mecanismos sofisticados de entrada no citoplasma do hospedeiro e manipulação do citoesqueleto, resultando em morte celular. As interações entre células do hospedeiro e bactérias podem resultar em produção de citocinas como o Fator de Necrose Tumoral alfa (TNF-alfa). Hepatócitos têm potencial de produzir citocinas pro-inflamatórias como TNF-alfa, quando invadidos por bactérias. No presente trabalho demonstramos o comportamento dos hepatócitos invadidos por L. monocytogenes pela análise microscópica, determinação da produção de TNF-alfa por bioensaio e análise da apoptose pela técnica TUNEL. A presença da bactéria, na razão que variou de 5 a 50.000 bactérias por célula, induziu ruptura das monocamadas celulares. Observamos presença de bactérias internalizadas na 1ª hora de incubação por microscopia eletrônica. Os níveis de TNF-alfa aumentaram da 1ª hora de incubação até a 6ª hora, variando de 0 a 3749 pg/mL. Nas 7ª e 8ª horas de incubação, ocorreram quedas não significativas dos níveis de TNF-alfa, indicando possível saturação dos receptores celulares. A quantidade de TNF-alfa produzido por hepatócitos foi dependente do tempo de incubação, assim como da proporção entre bactérias e células. A taxa de apoptose aumentou diretamente com o tempo de incubação (1 h a 8 + 24 h), variando de 0 a 43%, assim como com a razão bactérias : células. Estes resultados mostram a habilidade de L. monocytogenes não-hemolítica em invadir os hepatócitos, e as principais conseqüências deste fenômeno são: liberação de TNF-alfa e indução de apoptose. Assim, podemos especular que hepatócitos usam apoptose induzida por TNF-alfa para liberar bactérias de seu interior, facilitando a destruição destas pelo sistema imune.
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