Integração de pAN7-1 no genoma de Magnaporthe grisea mediada por enzima de restrição

AUTOR(ES)

Marchi, Carlos E., Brommonschenkel, Sérgio H., Queiroz, Marisa V. de, Mizubuti, Eduardo S. G.

FONTE

Fitopatologia Brasileira

DATA DE PUBLICAÇÃO

2006-06

RESUMO

Visando explorar a mutagênese insercional em Magnaporthe grisea, foram avaliadas a transformação dos protoplastos obtidos após adequação do protocolo e a eficiência da integração de pAN7-1 no genoma do ascomiceto na presença da enzima de restrição Hind III. Os protoplastos de M. grisea I-22 foram prontamente transformados para a resistência à higromicina. Quando o vetor linearizado com Hind III foi usado para transformar o fungo na presença de Hind III, a eficiência de transformação foi 1,1 a 8,1 vezes superior ao tratamento sem a adição da enzima. No geral, a melhor concentração de Hind III foi 5 unidades/reação de transformação. Tal concentração promoveu a produção média de 332 transformantes/µg de pAN7-1/10(7) protoplastos. A presença do gene de seleção hph no genoma de 18 indivíduos resistentes à higromicina foi confirmada por PCR.

ASSUNTO(S)

pyricularia grisea p. oryzae brusone transformação de fungos integração mediada por enzimas de restrição remi

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