Image analysis of DNA fragmentation and loss in V79 cells under apoptosis
AUTOR(ES)
Maria, Silvya Stuchi, Vidal, Benedicto de Campos, Mello, Maria Luiza S.
FONTE
Genetics and Molecular Biology
DATA DE PUBLICAÇÃO
2000-03
RESUMO
Análise de imagem de núcleos de fibroblastos V79 após três dias em cultura foi realizada em preparados submetidos à reação de Feulgen para discriminar células suspeitas de estarem em fases precoces da apoptose daquelas comprovadamente apoptóticas. Parâmetros tais como conteúdo de Feulgen-DNA, grau de condensação cromatínica e área nuclear foram estudados em associação com a morfologia estabelecida em termos visuais. Os fibroblastos foram inicialmente plaqueados numa densidade de 10(5) células/ml e encubados sob condições ótimas de cultura sem subcultura. Com a confluência, as células sofreram apoptose pela inibição por contato. A análise de imagem revelou três fenótipos nucleares definidos quanto a características morfológicas e níveis de condensação cromatínica. Foi detectado decréscimo no conteúdo de Feulgen-DNA das células apoptóticas mas também nas células suspeitas de apoptose. Admite-se que este decréscimo indique perda de DNA. A análise de imagem pode ser, portanto, uma ferramenta útil na discriminação de células mesmo em fases precoces da apoptose.
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