High molecular diversity of the fungus Guignardia citricarpa and Guignardia mangiferae and new primers for the diagnosis of the citrus black spot
AUTOR(ES)
Stringari, Danyelle, Glienke, Chirlei, Christo, Daniel de, Maccheroni Jr., Walter, Azevedo, João Lucio de
FONTE
Brazilian Archives of Biology and Technology
DATA DE PUBLICAÇÃO
2009-10
RESUMO
Marcadores de RAPD foram utilizados para investigar a distribuição da variabilidade genética de linhagens de Guignardia citricarpa, G. mangiferae, e Phyllosticta spinarum isolados em diversos hospedeiros no Brasil, Argentina, México, Costa Rica, Tailândia, Japão, EUA e África do Sul. O fungo Guignardia citricarpa Kiely (Phyllosticta citricarpa McAlp Van Der Aa) é o agente causal da Mancha Preta dos Citros (CBS), uma doença que afeta diversas plantas cítricas, causando dano a aparência dos frutos, prejudicando a exportação. Diversos estudos têm demonstrado a existência de uma espécie endofítica muito semelhante morfologicamente a G. citricarpa, e que permanece de forma endofítica no mesmo hospedeiro. Dificultando assim, a identificação de plantas e frutos livres do agente causa da CBS. A análise do perfil de RAPD revelou uma clara discriminação entre isolados patogênicos de G. citricarpa e isolados endofíticos (G. mangiferae e P. spinarum). A Análise de Coordenadas Principais (PCO) baseada na matriz de similaridade genética dos marcadores RAPD, demonstrou a formação de quatro grupos, sem relação com origem geográfica ou com hospedeiros utilizados. A análise de Variância de Marcadores Moleculares (AMOVA) indicou que 62,8% da variação genética é encontrada entre as populações (G. citricarpa, G. mangiferae, P. spinarum and Phyllosticta sp.). Entretanto, variação substancial foi encontrada dentro destas populações (37,2%). Bandas de RAPD exclusivas de isolados de G. citricarpa foram clonadas, sequenciadas e utilizadas na obtenção de SCARS (Sequence Characterized Amplified Regions), que permitiram o desenvolvimento de novos primers específicos para a identificação de G. citricarpa. Reações de PCR (Polymerase Chain Reaction) utilizando este par de primers corroboraram os agrupamentos obtidos pelos marcadores de RAPD, revelando sua eficiência na identificação do agente causal da CBS.
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