Genetic transformation of Drosophila willistoni using piggyBac transposon and GFP

AUTOR(ES)

Finokiet, Manuela, Goni, Beatriz, Loreto, Élgion Lúcio Silva

FONTE

Brazilian Archives of Biology and Technology

DATA DE PUBLICAÇÃO

2007-01

RESUMO

Descrevemos neste trabalho a transformação genética de Drosophila willistoni empregando o elemento transponível piggyBac como vetor e o gene EGFP (green fluorescent protein ) retirado da água-viva Aquorea victoria, como marcador de transformação. Embriões de D. willistoni em estágio pré-blastoderme, mutantes para o gene white, foram microinjetados com plasmídio contendo o marcador EGFP e as regiões ITRs do transposon piggyBac concomitantemente com um plasmídio auxiliar possuindo o gene da transposase de piggyBac sobre o controle do promotor do gene hsp70 de Drosophila melanogaster. Adultos transformantes Go foram gerados em uma taxa de 67%. A expressão de GFP em larvas, pupas e adultos foi observada somente até a terceira geração, sugerindo que este transposon não é estável em D. willistoni. Os indivíduos transformados exigem um alto nível de expressão de EGFP durante os estágios de larva e, também em adultos o gene marcador é expresso nos olhos, abdome, tórax e patas, mostrando um padrão de expressão mais amplo nesta espécie do que o registrado para outros drosofilídeos.

Documentos Relacionados

• The lepidopteran transposon vector, piggyBac, mediates germ-line transformation in the Mediterranean fruit fly
• Germline transformation of Aedes fluviatilis (Diptera:Culicidae) with the piggyBac transposable element
• PiggyMac, a domesticated piggyBac transposase involved in programmed genome rearrangements in the ciliate Paramecium tetraurelia
• piggyBac-based insertional mutagenesis in the presence of stably integrated P elements in Drosophila
• Genetic Differentiation Within and Between Species of the Drosophila willistoni Group*