Functional properties of a Brazilian derived mouse embryonic stem cell line

AUTOR(ES)
FONTE

An. Acad. Bras. Ciênc.

DATA DE PUBLICAÇÃO

06/03/2015

RESUMO

As linhagens de células tronco pluripotente embrionárias de camundongos (mESC) são derivadas da massa celular interna de blastocistos da fase inicial dos embriões. Como diferentes trabalhos têm demonstrado que a modulação dos canais iônicos pode interferir tanto no crescimento como no processo de diferenciação das células tronco embrionárias, tanto humanas como de camundongos, é importante caracterizar as propriedades eletrofisiológicas de novas mESC e compará-las com outras linhagens preestabelecidas. Neste trabalho, estudamos a comunicação intercelular através de junções comunicantes em mESC (USP-1, derivadas no Brasil pelo grupo da Dra. Lygia Pereira) e caracterizamos suas propriedades eletrofisiológicas. Usamos imunofluorescência e RT-PCR para detectar a presença de Cx43, de marcadores de pluripotência e de canais iônicos. No intuito de avaliar a possível comunicação entre mESC e cardiomiócitos em co-cultura, realizamos experimentos de injeção de corante, utilizando cardiomiócitos neonatais de rato, onde as células do coração expressavam a proteína verde fluorescente. Os experimentos de patch-clamp, usando bloqueadores específicos, mostrou a presença de dois tipos de correntes de saída de potássio, uma transiente (Ito) e outra retificadora tardia de ativação lenta (Iks). Não observamos correntes de cálcio ou de sódio nas mESC indiferenciadas. Com estes resultados concluímos que a linhagem mESC USP-1 expressa os marcadores clássicos de pluripotência, tem canais funcionais formados por Cx43, como demonstrado pela comunicação intercelular tanto entre elas mesmas como com cardiomiócitos, e possui um perfil electrofisiológico semelhante a outras linhagens celulares de mESC.

ASSUNTO(S)

cx43, propriedades eletrofisiológicas junções comunicantes células embrionárias de camundongo

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