Estabelecimento do protocolo de micropropagação da especie nativa Baccharis tridentata (Asteraceae) : estudos fisiologicos, anatomicos e histoquimicos in vitro

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2004

RESUMO

Várias espécies do gênero Baccharis têm sido usadas na medicina popular. Efeitos farmacológicos de muitas delas já foram comprovados, e, nos últimos anos, os compostos químicos de mais de 60 espécies foram identificados. No entanto, são raros os estudos biotecnológicos em espécies deste gênero. B. tridentata e B. dracunculifolia são plantas nativas, aromáticas e produzem óleo essencial, no qual os sesquiterpenos em maior concentração são: nerolidol, espatulenol e b-cadineno. Recentemente, foi comprovado o efeito inibitório do nerolidol no crescimento de Plasmodium falciparum, o mais perigoso agente causador da malária. Devido a alta mortalidade causada por esta doença e ao fato deste parasita estar se tomando resistente aos medicamentos convencionais, pesquisas com plantas que apresentam potencial terapêutico são importantes. Com a finalidade de obter rapidamente um grande número de plantas com as mesmas características da planta mãe, foram desenvolvidos protocolos de micropropagação para as duas espécies. A micropropagação de B. tridentata foi estabelecida através de ápices caulinares de uma única planta, permitindo a formação de um banco de plantas homogêneas (done) que foram utilizadas como fonte de explantes para os experimentos posteriores. Foi desenvolvido o protocolo de aclimatação para esta espécie, com 80% de sobrevivência das plantas deste done no ambiente ex-vitro. Já para B. dracunculifolia, devido a intensa oxidação dos explantes, a micropropagação foi possível somente através da germinação de sementes. A forte recalcitrância ao cultivo in vitro dificultou o prosseguimento dos experimentos com esta espécie. A espécie B. tridentata cresce em pequenas cavidades nas superficies rochosas do Planalto do ltatiaia. A peculiaridade deste habitat levou-nos a realizar alguns estudos fisiológicos in vitro, visando contribuir para a compreensão de alguns mecanismos de adaptação desta espécie, além de permitir o aperfeiçoamento do protocolo de micropropagação. Foram avaliados os efeitos da variação do pH inicial, da fonte preferencial de nitrogênio e da concentração de alguns macronutrientes no crescimento. Após 31 dias de cultivo, o crescimento das plantas resultou em acidificação do meio, com pH final de 3,5. Este clone apresentou maior crescimento (altura e massa de matéria seca) com fonte de nitrogênio constituída de mistura de NO3-+NH/, quando comparado com NO3- ou NH/ fornecidos isoladamente. O aumento do peso seco das raízes foi favorecido pela diminuição da concentração de magnésio no meio. Estudos recentes têm demonstrado que as culturas de partes aéreas podem constituir fonte viável de compostos secundários úteis, principalmente aqueles produzidos em estruturas altamente diferenciadas, como os tricomas glandulares (TG). Entretanto, plantas cultivadas in vitro apresentam, em geral, menor produção destes compostos, quando comparadas com aquelas cultivadas em campo. Esta baixa produção do cultivo in vitro tem sido relacionada com o menor grau de diferenciação. Este presente trabalho investigou os efeitos de alguns fatores microambientais, nutricionais e fitohormonais na diferenciação de algumas estruturas foliares, especialmente os TG, de um clone de B. tridentata cultivado in vitro. As plantas cultivadas in vitro apresentaram TG morfologicamente semelhantes aos da planta da casa de vegetação e do clone aclimatado. A utilização do tampão de algodão no frasco de cultura (em substituição ao PVC utilizado comumente como vedação) resultou em maior diferenciação das células paliçádicas do mesofilo. Neste tratamento, foi observado espaço subcuticular formado pela distensão da cutícula dos TG, sugerindo a secreção de material. O uso da vedação de algodão alterou o microambiente do frasco de cultura (diminuição da umidade e alteração das trocas gasosas) e provavelmente, favoreceu a diferenciação destas estruturas foliares. Outra alternativa para aumentar a produção de compostos acumulados nos TG é através do aumento da densidade destas estruturas (número de TG/mm2). Desta forma, investigamos o efeito dos mesmos fatores microambientais, nutricionais e fitohormonais, acima mencionados na densidade dos tricomas, em folhas adultas do clone de B. tridentata cultivado in vitro. Plantas cultivadas em casa de vegetação e clone aclimatado apresentaram maior densidade de TG do que o clone cultivado in vitro. Nos três casos a densidade dos TG foi maior na epiderme superior. Entre os tratamentos aplicados às plantas cultivadas in vitro, foi constatada interação altamente significativa da concentração de sacarose e fotoperiodo. A maior densidade foi favorecida pela luz contínua e 3% de sacarose. Embora o número de TG/mm2 (otimizado) obtido in vitro tenha sido menor do que o apresentado pelas plantas cultivadas em casa de vegetação e pelo done adimatado, ele foi significativo, principalmente se considerarmos o curto tempo de cultivo (31 dias). Portanto, há possibilidade de melhorar estes resultados, aumentando o tempo de exposição aos tratamentos

ASSUNTO(S)

anatomia vegetal compostas morfogenese propagação-in vitro

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