Efeitos do glicerol sobre a dependÃncia tÃrmica da estabilidade de eritrÃcitos humanos / Effects of glycerol on the thermal dependence of the stability of human erythrocytes

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2007

RESUMO

A incubaÃÃo de eritrÃcitos humanos com etanol em soluÃÃo salina fisiolÃgica, por 30 minutos, pode produzir lise do estado morfolÃgico expandido (R), de menor estabilidade, ou formaÃÃo de um estado morfolÃgico contraÃdo (T), de maior estabilidade. O estado R ocorre em condiÃÃes fisiolÃgicas e sofre lise sob concentraÃÃes pouco elevadas de etanol. A lise do estado R por etanol pode ser caracterizada pela concentraÃÃo de etanol no ponto de meia-transiÃÃo da curva de lise dos eritrÃcitos por etanol (D50R). A lise do estado R por hipotonicidade pode ser caracterizada pela concentraÃÃo salina no ponto de meia-transiÃÃo da curva de lise dos eritrÃcitos por estresse hipotÃnico (H50). O estado T ocorre em condiÃÃes de hiperosmolaridade e sofre lise em concentraÃÃes mais elevadas de etanol. Dependendo de sua concentraÃÃo, o prÃprio etanol pode produzir lise ou osmoestabilizaÃÃo de eritrÃcitos humanos. O objetivo desse trabalho foi estudar os efeitos da concentraÃÃo de glicerol e da temperatura sobre a estabilidade do estado R de eritrÃcitos humanos (D50R) em funÃÃo da aÃÃo de etanol e da concentraÃÃo salina. Foram utilizadas amostras de sangue de 12 voluntÃrias sadias com 24  3 anos de idade. A percentagem de hemÃlise, apÃs incubaÃÃo por 30 minutos, em funÃÃo da concentraÃÃo de etanol (0-36%) em soluÃÃo salina fisiolÃgica foi estudada por espectrofotometria em 540 nm na ausÃncia e na presenÃa de glicerol a 1,5 mol.L-1 em diferentes temperaturas (7, 12, 17, 22, 27, 32, 37, 42 e 47ÂC) e na presenÃa de diferentes concentraÃÃes de glicerol (0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 mol.L-1) a 7 ÂC. A percentagem de hemÃlise, apÃs incubaÃÃo por 30 minutos, tambÃm foi determinada em funÃÃo da concentraÃÃo salina na ausÃncia e na presenÃa de glicerol a 1,5 mol.L-1 e à 7 ÂC. As percentagens de hemÃlise em funÃÃo da concentraÃÃo de etanol em soluÃÃo salina fisiolÃgica ou em funÃÃo da concentraÃÃo salina foram ajustadas a curvas de regressÃo sigmoidal. Os ajustes Ãs curvas de regressÃo e a existÃncia de diferenÃas entre os grupos foram considerados significantes quando P era menor do que 0,05. Os valores de D50R diminuÃram significantemente, de acordo com curvas de caimento sigmoidal, com o aumento da temperatura na ausÃncia e na presenÃa de glicerol a 1,5 mol.L-1. Isso mostra que o aumento na temperatura induz uma transiÃÃo em dois estados no padrÃo de estabilidade dos eritrÃcitos, um estado de menor estabilidade (R) e um estado de maior estabilidade (T). Os valores de D50R tambÃm declinaram significantemente, de acordo com uma curva de caimento sigmoidal, com o aumento na concentraÃÃo de glicerol. Isso mostra que a concentraÃÃo de glicerol tambÃm induz uma transiÃÃo de estados nos eritrÃcitos, de um estado de menor estabilidade (R), presente sob menores concentraÃÃes de glicerol, para um estado de maior estabilidade (T), presente sob maiores concentraÃÃes de glicerol. A presenÃa de glicerol a 1,5 mol.L-1 diminui progressivamente a estabilidade dos eritrÃcitos com a diminuiÃÃo da temperatura entre 32 e 7 ÂC, mas aumenta a estabilidade dos eritrÃcitos acima de 37 ÂC. Esse comportamento foi atribuÃdo à existÃncia de uma pressÃo osmÃtica crÃtica gerada pela aÃÃo conjunta do etanol, do glicerol e da temperatura. Abaixo dessa pressÃo osmÃtica crÃtica haveria predomÃnio do estado R e acima dela haveria predomÃnio do estado T dos eritrÃcitos. Embora a presenÃa de glicerol a 1,5 mol.L-1 diminua a estabilidade dos eritrÃcitos contra a aÃÃo do etanol, ela aumenta a estabilidade contra a lise por hipotonicidade, a 7 ÂC, uma vez que os valores de H50 foram significantemente menores na presenÃa de glicerol a 1,5 mol.L-1 do que na ausÃncia desse osmÃlito. Nessa temperatura, a conjunÃÃo das aÃÃes do etanol, da temperatura e do glicerol determinaria o predomÃnio do estado R dos eritrÃcitos, que tem uma menor estabilidade e sofre mais facilmente a aÃÃo caotrÃpica do etanol. Entretanto, na ausÃncia do etanol, a presenÃa do glicerol determinaria uma menor entrada de Ãgua nos eritrÃcitos, o que tornaria mais difÃcil sua lise por hipotonicidade.

ASSUNTO(S)

etanol termodinÃmica biolÃgica ethanol biological thermodynamics estabilidade de membranas glicerol temperatura membrane stability erythrocytes glycerol temperature genetica cÃlulas - membranas eritrÃcitos

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