Diagnóstico e controle de lentivírus de pequenos ruminantes (LVPR) em caprinos.

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2007

RESUMO

No Brasil, o Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) lançou um Programa de Sanidade Caprina e Ovina (PNSCO) que contempla um Plano Nacional de Vigilância e Controle das Lentiviroses de Pequenos Ruminantes (PNVCLVPR) onde está preconizado o uso da imunodifusão em gel de agar (IDGA) como teste de rotina no diagnóstico das lentiviroses, sendo empregado, como prova confirmatória e para fins de certificação, o western blot (WB), embora este último não esteja disponível no país. Neste trabalho foi padronizado um WB para diagnóstico de lentivírus de pequenos ruminantes (LVPR) em caprinos, utilizando antígeno através de um sistema simplificado de purificação, iniciado com a concentração por diálise do sobrenadante de culturas celulares de córnea infectadas e seguido de centrifugação em gradiente contínuo de sacarose. No WB, cinco proteínas virais foram reconhecidas pelo soro padrão positivo e apresentavam pesos moleculares de 14-16, 25, 40, 50 e 70 kDa. Ao se utilizarem amostras de campo de soro caprino positivas no immunoblot, pelo menos uma proteína viral foi reconhecida por todas as amostras. Todos os soros apresentavam anticorpos contra a proteína de 25 kDa. Reação positiva a gp40 foi observada em quatro animais, com intensidade de reação discreta em três deles. Dois animais apresentaram reação positiva à p16, e dois à gp50, embora pouco intensas. Foi ainda padronizado um ELISA utilizando proteína-G como conjugado, (ELISA-G), a partir de um ELISA indireto (ELISA-i). Os valores da relação positivo/negativo (P/N) obtidos para os soros padrão foi significativamente superior (P <0,05) no ELISA-G (10,9) do que no ELISA-i (4,8). Ao testar um grupo de 8 soros positivos e 10 negativos, observou-se, basicamente, o mesmo comportamento, com valores de P/N, no ELISA-G de 4,68 e no ELISA-i de 3,33, demonstrando maior capacidade de discriminação no caso do ELISA-G, o que é altamente desejável em padronização de ensaios imunoenzimáticos (EIE). Estes testes estão padronizados, porém o WB necessita ser mais amplamente avaliado e o ELISA requer validação (estimativa da sensibilidade e especificidade), com base no teste de um número significativo de amostras da população de caprinos e ovinos, representativas das diferentes condições epidemiológicas existentes no Brasil, para ser utilizado nos programas de controle de LVPR. Utilizando o WB, em adição a IDGA, foi realizada uma sorologia em animais nascidos por parto induzido, separados imediatamente após o nascimento de suas mães, e alimentados com colostro artificial ou tratado termicamente. Estas medidas, provavelmente, dificultariam a transmissão de LVPR das cabras positivas a seus descendentes, os quais apresentariam título baixo ou nulo de anticorpos, porém os resultados dos dois testes revelaram que, embora sem alterações clínicas compatíveis com infecção por LVPR, 27,27% (12/44) dos animais anticorpos contra LVPR, concluindo-se que as medidas de manejo empregadas não foram suficientes para evitar a infecção pelos lentivírus; possivelmente, ocorreu infecção intrauterina, e/ou falha na inativação do vírus no colostro e leite, além da transmissão horizontal.

ASSUNTO(S)

lentivírus caprino maedi-visna, elisa caev controle medicina veterinaria western blot idga lvpr diagnóstico maedi-visna caev diagnosis western blot idga elisa control caprine

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