Development and validation of analytical methodology for determination of folatos in foods. / Desenvolvimento e validação de metodologia analitica para determinação de folatos em alimentos.

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

2004

RESUMO

O Brasil é um país que carece de metodologias analíticas apropriadas para a determinação de folatos, uma classe de vitamina cuja deficiência pode acarretar vários distúrbios bioquímicos no organismo humano. Visando atender a esta necessidade, neste trabalho foi desenvolvida e validada uma metodologia para determinação dos folatos em alimentos, utilizando a Cromatografia Liquida de Alta Eficiência (CLAE). A maior vantagem do método proposto foi a simplicidade obtida na extração da amostra para análise, em relação as metodologias existentes. A extração dos folatos foi feita com acetato de amônia (0,05mol/L), seguida da limpeza do extrato com ácido tricloroacético. Os folatos, 5-metiltetraidrofolato (5MTHF), 5-formiltetraidrofolato (5FTHF), tetraidrofolato (THF), 10-formil-ácido fólico (10FAF), 10-metil-ácido fólico (10MAF) e ácido fólico (AF) foram separados em coluna de fase reversa C18 por eluição com gradiente de fase móvel (acetonitrila/ solução com ácido acético). A detecção foi através da fluorescência natural dos compostos, com exceção do ácido fólico que foi detectado na região do ultra-violeta e, a quantificação dos analítos realizada por padronização externa. Os limites de detecção e as taxas de recuperação para as diferentes formas de folatos foram, respectivamente, 5pg/mL e 94-108% para o 5MTHF, 7pg/mL e 97-102% para o THF, 30pg/mL e 97-104% para o 5FTHF, 30pg/mL e 96-105% para o 10FAF, 5ng/mL e 97-102% para o AF e 5ng/mL e 98-103% para o 10MAF. Os limites de quantificação foram considerados como duas vezes os limites de detecção. A repetibilidade apresentou CV« 3,9% para todas as formas da vitamina. Completando a validação da metodologia, a exatidão foi avaliada utilizando três materiais de referência certificado, fígado de porco (BCR487), leite em pó (BCR421) e misturas de vegetais (BCR485). Para avaliar a versatilidade do método, este foi aplicado a três matrizes diferentes: duas frutas tropicais (jenipapo e murici) coletadas em cidades diferentes do país (Fortaleza e Belém), carne bovina e dois tipos de bebidas fermentadas, vinho tinto e cerveja pilsen. As frutas foram as que apresentaram os maiores teores de folatos totais, 146,5mg/100g e 80,4mg/100g para o murici e jenipapo, respectivamente. Houve diferenças significativas entre os valores obtidos de frutas da região norte e nordeste do país. O vinho tinto apresentou variação no teor de folatos totais de 6,5 a 23,7mg/100mL. A cerveja apresentou variação de 292,8 a 652,6mg/100mL. Os teores encontrados na carne bovina ficaram em torno de 14,0mg/100g. O 5MTHF foi a forma predominante no músculo e no murici, já o para o jenipapo e o vinho a distribuição de teores individuais foi equitativa sendo que a concentração do 10MAF se destacou um pouco mais em comparação com os outros folatos.

ASSUNTO(S)

alimentos - analise foods alimentos analise cromatografica vitaminas vitamins foods cromatographic analysis

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