Determinação seletiva de p-nitrofenol com eletrodo de carbono vitreo recoberto com membrana de Nafion

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2000

RESUMO

A presente dissertação descreve o desenvolvimento de um eletrodo modificado para a determinação seletiva de p-nitrofenol (pNF) e sua aplicação em determinações de atividade enzimática de fosfatases ácidas, cujo substrato é o p-nitrofenilfosfato (pNFF). Inicialmente foi estudado o comportamento eletroquímico do pNF sobre a superficie do eletrodo de carbono vítreo utilizando a técnica de voltametria de pulso diferencial. As condições otimizadas para a redução do grupo nitro foram: amplitude de pulso de 25 mV, velocidade de varredura de 10 mV s, tampão fosfato 0,1 mol L e pH entre 4 e 6. O eletrodo apresentou uma faixa de resposta linear de 2,0 10 a 1,9 10 mol L para o pNF, com eletrodo sem modificação. Entretanto, o pNFF apresentou um potencial de redução muito próximo do pNF , interferindo na resposta eletroquímica. A eliminação da interferência do pNFF foi obtida recobrindo a superficie do eletrodo de carbono vítreo com uma membrana de Nafion. Um volume de 25 mL de uma solução de Nafion 5% (m/v) foi suficiente para formar um filme sobre a superficie do eletrodo para eliminar a interferência do pNFF. Contudo a presença da membrana de Nafion provocou uma diminuição na sensibilidade de 18,5 para 8,8 mA mmol L e um aumento no limite de detecção de 14,86 para 17,08 mmol L para a determinação de pNF. Este comportamento foi atribuído à diminuição da constante de velocidade de transferência de elétrons (kf), e demonstrado através do estudo cinético com o eletrodo de carbono vítreo recoberto com membrana de Nafion (kf = 3,34 10 cm s) em comparação com o eletrodo de carbono vítreo sem membrana (kf = 7,67 10 cm s). O eletrodo de carbono vítreo recoberto com membrana de Nafion mostrou um intervalo de resposta linear de 2,0 10 a 2,3 10 mol L para o pNF, ajustado pela equação: Ip = 0,157(0,015) + 0,0089(0,0001) [pNF] para N = 22, com um coeficiente de correlação linear de 0,9984. O eletrodo de carbono vítreo recoberto com membrana de Nafion foi empregado para a determinação da atividade enzimática da fosfatase ácida de semente de mamona sendo o valor de Km encontrado de 0,31 mmol L, o que é da mesma ordem de grandeza ao obtido pelo método espectrofotométrico reportado na literatura cujo valor foi de 0,52 mmol L.

ASSUNTO(S)

fosfatase acida eletrodos

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