Detecção e caracterização do gene da proteína capsidial de um isolado de Grapevine virus B de videiras do Sul do Brasil com intumescimento dos ramos

AUTOR(ES)

NICKEL, OSMAR, FAJARDO, THOR V. M., ARAGÃO, FRANCISCO J. L., CHAGAS, CÉSAR M., KUHN, GILMAR B.

FONTE

Fitopatologia Brasileira

DATA DE PUBLICAÇÃO

2002-06

RESUMO

Um isolado de Grapevine virus B (GVB), obtido por indexação de Vitis labrusca e V. vinifera na indicadora LN33, foi transmitido mecanicamente para várias espécies do gênero Nicotiana. O vírus foi parcialmente purificado de N. cavicola e a proteína capsídica foi estimada em 23 kDa por SDS-PAGE. Ao microscópio eletrônico, observou-se, em extrato foliar de N. occidentalis e N. cavicola, partículas flexuosas com estriações transversais, predominantemente medindo 750-770 x 12 nm, com comprimento modal de 760 nm. A decoração das partículas indicou reação clara e positiva com anti-soro contra GVB. Em DAS-ELISA, GVB foi detectado em extratos de Nicotiana spp. e de videira (Vitis spp.). Em Western blots foram observadas reações específicas e cruzadas, da proteína capsídica de GVB com os anti-soros contra GVB e GVA, respectivamente. A partir do RNA viral extraído de N. occidentalis, foi amplificado por RT-PCR um fragmento de 594 bp específico de GVB, que codificou 197 aminoácidos do gene da proteína capsídica. As seqüências de nucleotídeos e de aminoácidos deduzidos do gene da proteína capsidial apresentaram alta identidade com isolados italianos e japoneses de GVB.

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