Detecção de células com fenótipo HPN por citometria de fluxo, utilizando análise multiparamétrica

AUTOR(ES)

Rocha, Juliana Maria Camargos, Silva, Maria Luíza, Souza, Marcelo Eduardo de Lima, Murao, Mitiko, Araújo, Sérgio Schusterschitz da Silva, Santos, Silvana Maria Elói

FONTE

J. Bras. Patol. Med. Lab.

DATA DE PUBLICAÇÃO

2014-04

RESUMO

Introdução:O diagnóstico laboratorial da hemoglobinúria paroxística noturna (HPN), doença caracterizada por deficiência de síntese da molécula de ancoragem glicosilfosfatidilinositol (GPI), baseia-se na detecção de células sanguíneas deficientes em proteínas ancoradas ao GPI, por citometria de fluxo. Clones de células com fenótipo HPN podem ser detectados em pacientes com anemia aplásica (AA) e síndrome mielodisplásica (SMD), com implicações terapêuticas.Objetivos:Validar técnica sensível para detecção de células HPN, por citometria de fluxo, e avaliar a frequência dos clones em pacientes com AA e SMD.Métodos:Amostras de 20 pacientes com AA, 30 pacientes com SMD e 20 voluntários (controles) foram analisadas, utilizando anticorpos monoclonais anti-CD16, CD24, CD55 e CD59 (neutrófilos); CD14 e CD55 (monócitos); e CD55 e CD59 (hemácias); além do reagente de aerolisina fluorescente (FLAER) (neutrófilos e monócitos) e marcadores de linhagem celular. A comparação do tamanho dos clones HPN detectados em neutrófilos e monócitos, pelas diferentes combinações de reagentes, foi realizada por análise de variância (ANOVA) e correlação de Pearson.Resultados:Em cinco (25%) pacientes com AA foram identificadas células HPN, em proporções entre 0,14% e 94,84% dos eventos analisados. O clone não foi detectado nos pacientes com SMD. Contudo, a análise dessas amostras permitiu evidenciar as dificuldades técnicas secundárias à presença de células imaturas e displásicas circulantes. O reagente FLAER propiciou separação precisa das células alteradas.Conclusão:A análise multiparamétrica por citometria de fluxo apresenta sensibilidade e acurácia na detecção de clones HPN subclínicos. O reagente FLAER apresenta excelente desempenho na detecção do clone HPN.

ASSUNTO(S)

hemoglobinúria paroxística noturna flaer citometria de fluxo anemia aplásica síndrome mielodisplásica

Documentos Relacionados

• Detecção das anormalidades hemopoieticas por citometria de fluxo, e sua utilidade no diagnostico das sindromes mielodisplasicas
• Avaliação da interferência de plaquetas na contagem de reticulócitos por citometria de fluxo, utilizando laranja de tiazol
• Identificação de milho haploide por citometria de fluxo, marcadores morfológicos e moleculares
• Recomendações para garantia da qualidade em citometria de fluxo multiparamétrica: primeiro consenso do Grupo Brasileiro de Citometria de Fluxo (GBCFLUX)
• Detecção da doença residual mínima por citometria de fluxo em pacientes com mieloma múltiplo submetidos a transplante autólogo de células tronco hematopoéticas